体外6种疱疹类病毒DNA扩增及其基因分型

来源 :中华传染病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sscy2002
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目的 快速检测 6种疱疹类病毒DNA。方法 在疱疹类病毒高度同源序列DNA多聚酶基因中设计两对通用引物 ,一对扩增单纯疱疹病毒Ⅰ型与Ⅱ型、爱泼斯坦 巴尔病毒和人巨细胞病毒 4种病毒 ,另一对扩增水痘 带状疱疹病毒和人类疱疹病毒 6型 2种病毒。经DNA聚合酶链反应(PCR)扩增 ,并对扩增产物进行分子克隆序列分析后 ,选择BamHⅠ或BstUⅠ酶切对扩增产物进行鉴别。结果  6种标准病毒株PCR扩增后产物为 5 10~ 5 92bp ,其最小检出量为 0 .1fg ,与乙型肝炎病毒、真菌、细菌和人类基因组DNA无交叉反应。用该方法检测临床 89份脑脊液 (CSF)和 75份血标本中的疱疹类病毒 ,13份 (14 .6 % )CSF和 2 6份 (34.7% )血标本为阳性 ,通过BamHⅠ或BstUⅠ两种酶切后能明确系何种疱疹类病毒。同时用酶联免疫吸附 (ELISA)法检测该标本的HSVⅠ /Ⅱ、EBV和CMV这 4种病毒的IgM ,10例阳性。这 4种病毒的PCR阳性检出率为 30 .7% ,而ELISA法为13.3% (P <0 .0 5 ) ,具有显著的差异性。 38例正常健康儿童的血和 9份非病毒感染的CSF标本 6种疱疹类病毒DNA均为阴性。结论 PCR加限制性内切酶片段长度多态性分析具有特异敏感 ,快速准确的特点 ,为疱疹类病毒感染的早期快速诊断提供了有效的手段。
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