观察过表达人Runt相关转录因子3(RUNX3)对腺样囊性癌细胞上皮-间充质转化(EMT)的影响。
方法利用慢病毒感染腺样囊性癌SACC-83、SACC-LM细胞，获得稳定过表达RUNX3的细胞株(过表达RUNX3组)，并设置空白慢病毒感染的阴性对照细胞株(阴性对照组)。用Western blot法检测RUNX3蛋白过表达；采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blot检测过表达RUNX3对SACC-83、SACC-LM细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、纤维粘连蛋白(Fibronectin)及Snail基因mRNA和蛋白表达水平的影响；采用Western blot检测过表达RUNX3对SACC-83、SACC-LM细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9表达的影响。采用细胞划痕实验检测细胞迁移能力。
结果慢病毒感染SACC-83、SACC-LM细胞后，其RUNX3蛋白表达[(0.968±0.035)、(0.956±0.037)]均显著上调，与阴性对照组[(0.425±0.031)、(0.196±0.028)]比较差异有统计学意义(P＝0.002、P＝0.000)。RT-qPCR和Western blot检测表明，与阴性对照组比较，过表达RUNX3组的Vimentin、Fibronectin、Snail mRNA表达下降34.2%～61.9%、蛋白表达下降31.8%～71.8%；而SACC-83细胞的E-cadherin mRNA和蛋白分别上调2.671、2.237倍，SACC-LM细胞的E-cadherin mRNA和蛋白分别上调3.687、5.454倍。Western blot检测显示，与阴性对照组比较，过表达RUNX3组的MMP-2和MMP-9表达显著下降(P＝0. 005、P＝0.004)。细胞划痕实验显示，过表达RUNX3细胞的迁移率较低。
结论RUNX3可以抑制人腺样囊性癌细胞的EMT，这是其抑制腺样囊性癌细胞侵袭与转移的机制之一。