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目的
采用活细胞荧光成像技术连续观察胶质瘤干细胞向内皮细胞分化过程中多种分子标记物的变化。
方法研究运用活细胞荧光成像技术,对胶质瘤干细胞细胞株GSC-1的分化过程进行12 h动态观察。同时应用免疫荧光技术在三维培养0、2、6 h行内皮细胞表面标记物CD34染色,并通过光镜观察GSC-1的形态学变化。
结果在三维培养下GSC-1细胞能形成管道样结构,部分细胞表达内皮细胞标记物CD34,CD34阳性细胞数量随分化时间增长而增加(P<0.05),而细胞的干性逐渐消失。活细胞荧光成像观察到同一视野下CD34阳性细胞数随诱导分化的时间推移而增加;单个GSC-1细胞由CD34阴性细胞转变成为CD34阳性细胞的全过程。
结论活细胞荧光成像技术监测细胞分化过程得到与传统免疫荧光方法一致的结果,而且更直观、更精确,能长时间对单个细胞追踪观察。