【摘 要】
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目的 比较3种成软骨诱导培养基对单层培养和微球培养的人脂肪干细胞(human adipose mesenchymal stem cells,hASCs)体外成软骨分化的效果.方法 从人脂肪组织中提取hASCs,分别
【机 构】
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南方医科大学珠江医院脊柱外科,广州510280;南方医科大学基础医学院解剖教研室暨广东省医学生物力学重点实验,广州510515
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目的 比较3种成软骨诱导培养基对单层培养和微球培养的人脂肪干细胞(human adipose mesenchymal stem cells,hASCs)体外成软骨分化的效果.方法 从人脂肪组织中提取hASCs,分别采用单层培养和微球培养,加入3种不同成分的成软骨诱导培养基,A组:胎牛血清(FBS)+10 ng/ml转化生长因子3(TGF-β3);B组:胰岛素-转铁蛋白-亚硒酸钠(ITS)+1 ng/ml TGF-β3;C组:ITS+10 ng/mL TGF-β3.3周后提取单层培养的细胞蛋白进行成软骨相关标志物检测,并对细胞微球进行阿尔新蓝、甲苯胺蓝、天狼星红染色,比较成软骨效果.结果 3周后单层培养体系C组的软骨标志物表达最高,微球培养阿尔新蓝、甲苯胺蓝、天狼星红染色C组着色最深.结论 作为培养基添加物,ITS在诱导hASCs成软骨分化时的效果优于FBS,而作为刺激hASCs成软骨的重要生长因子TGF-β3,10 ng/ml的浓度比1 ng/ml作用更强.
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