观察微小RNA(miRNA,miR)-371-5p对人结直肠癌LoVo和SW620细胞增殖和凋亡的影响。
方法构建miR-371-5p过表达慢病毒载体和稳定沉默miR-371-5p基因载体[miR-371-5p/短发卡RNA(shRNA)],并转染LoVo和SW620细胞,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定miR-371-5p的表达,细胞计数试剂盒(CCK-8)、平板克隆形成实验、软琼脂集落形成实验、流式细胞仪检测LoVo和SW620细胞的增殖和凋亡。
结果LoVo和SW620细胞转染miR-371-5p后miR-371-5p表达(14.25±0.25、10.01±0.19)高于阴性对照组和空白对照组(1.03±0.02、1.04±0.03;1.00±0.00、1.00±0.00;F=21.426、8.957,P=0.000、0.003),LoVo和SW620细胞转染miR-371-5p/shRNA后miR-371-5p表达(0.08±0.00、0.11±0.01)低于阴性对照组和空白对照组(0.97±0.02、1.04±0.03;1.00±0.00、1.00±0.00;F=15.231、8.537,P=0.000、0.005)。LoVo和SW620细胞转染后3 d和7 d,转染miR-371-5p的细胞增殖水平低于阴性对照组和空白对照组(F=5.932、19.324、7.256、35.846,P=0.003、0.000、0.000、0.000);转染miR-371-5p/shRNA的细胞增殖高于阴性对照组和空白对照组(F=37.342、43.254、43.242、105.231,P=0.003、0.000、0.000、0.000)。转染miR-371-5p的LoVo和SW620细胞克隆个数低于阴性对照组和空白对照组(F=5.432、4.023,P=0.004、0.022);转染miR-371-5p/shRNA的LoVo和SW620细胞克隆个数高于阴性对照组和空白对照组(F=3.976,4.732,P=0.015、0.011)。转染miR-371-5p的LoVo和SW620细胞集落个数低于阴性对照组和空白对照组(F=5.647、4.023,P=0.007、0.015);转染miR-371-5p/shRNA的LoVo和SW620细胞集落个数高于阴性对照组和空白对照组(F=4.231、4.231,P=0.012、0.013)。转染miR-371-5p和miR-371-5p/shRNA的LoVo和SW620细胞凋亡率和阴性对照组和空白对照组比较差异均无统计学意义(F=0.883、1.017、1.165、0.954,P=0.742、0.474、0.483、0.621)。
结论miR-371-5p抑制人结直肠癌LoVo和SW620细胞的增殖,对细胞凋亡无明显影响。