微小RNA-371-5p对人结直肠癌细胞增殖和凋亡的影响

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong447
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的

观察微小RNA(miRNA,miR)-371-5p对人结直肠癌LoVo和SW620细胞增殖和凋亡的影响。

方法

构建miR-371-5p过表达慢病毒载体和稳定沉默miR-371-5p基因载体[miR-371-5p/短发卡RNA(shRNA)],并转染LoVo和SW620细胞,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定miR-371-5p的表达,细胞计数试剂盒(CCK-8)、平板克隆形成实验、软琼脂集落形成实验、流式细胞仪检测LoVo和SW620细胞的增殖和凋亡。

结果

LoVo和SW620细胞转染miR-371-5p后miR-371-5p表达(14.25±0.25、10.01±0.19)高于阴性对照组和空白对照组(1.03±0.02、1.04±0.03;1.00±0.00、1.00±0.00;F=21.426、8.957,P=0.000、0.003),LoVo和SW620细胞转染miR-371-5p/shRNA后miR-371-5p表达(0.08±0.00、0.11±0.01)低于阴性对照组和空白对照组(0.97±0.02、1.04±0.03;1.00±0.00、1.00±0.00;F=15.231、8.537,P=0.000、0.005)。LoVo和SW620细胞转染后3 d和7 d,转染miR-371-5p的细胞增殖水平低于阴性对照组和空白对照组(F=5.932、19.324、7.256、35.846,P=0.003、0.000、0.000、0.000);转染miR-371-5p/shRNA的细胞增殖高于阴性对照组和空白对照组(F=37.342、43.254、43.242、105.231,P=0.003、0.000、0.000、0.000)。转染miR-371-5p的LoVo和SW620细胞克隆个数低于阴性对照组和空白对照组(F=5.432、4.023,P=0.004、0.022);转染miR-371-5p/shRNA的LoVo和SW620细胞克隆个数高于阴性对照组和空白对照组(F=3.976,4.732,P=0.015、0.011)。转染miR-371-5p的LoVo和SW620细胞集落个数低于阴性对照组和空白对照组(F=5.647、4.023,P=0.007、0.015);转染miR-371-5p/shRNA的LoVo和SW620细胞集落个数高于阴性对照组和空白对照组(F=4.231、4.231,P=0.012、0.013)。转染miR-371-5p和miR-371-5p/shRNA的LoVo和SW620细胞凋亡率和阴性对照组和空白对照组比较差异均无统计学意义(F=0.883、1.017、1.165、0.954,P=0.742、0.474、0.483、0.621)。

结论

miR-371-5p抑制人结直肠癌LoVo和SW620细胞的增殖,对细胞凋亡无明显影响。

其他文献
目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-125a在肺癌细胞侵袭、迁移和增殖能力的影响及其机制。方法miR-125a类似物(miR-125a-mimic)过表达miR-125a,聚合酶链反应(PCR)检测过表达效率;Transwell侵袭实验检测miR-125a-mimic对肺癌细胞侵袭能力的影响;划痕实验检测miR-125a-mimic对肺癌细胞迁移能力的影响;细胞计数试剂盒(CCK-8)检测m
3D打印技术是一种快速成型技术,通过重建的三维数字模型,将其分割成为层状后逐层堆积成为实体模型。本文主要讨论3D打印技术在股骨头坏死治疗中的应用及与股骨头坏死常规治疗方法进行比较。最后根据3D打印的技术特点,分析3D打印未来的发展趋势。
目的探讨红芪多糖调控磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸苏氨酸激酶(PI3K/Akt)信号通路抑制结肠癌细胞增殖及促进凋亡的机制。方法25、50、100、200、400 mg/L的红芪多糖干预人结肠癌SW480细胞24、48、72 h,细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测细胞增殖,计算半数抑制浓度(IC50)值;190 mg/L的红芪多糖干预SW480细胞48 h,不加药物的作为对照组,流式细胞仪检测细胞周
目的探讨RNA干扰中性粒细胞相关载脂蛋白(NGAL)基因的表达对人脑胶质瘤细胞凋亡的影响及机制。方法提取人脑胶质瘤组织及人脑胶质瘤SHG-44、U87、U251细胞中的蛋白,Western blot检测NGAL的表达;将siRNA-NC、NGAL-siRNA1、NGAL-siRNA2、NGAL-siRNA3转染U251细胞,未转染任何siRNA的作为对照组,各组细胞转染48 h后,Western
目的检测结直肠癌、结直肠腺瘤及正常结直肠黏膜中Pokemon的表达,探讨结直肠腺瘤恶变过程中Pokemon的作用及价值。方法收集结直肠癌60例、结直肠腺瘤80例、结直肠正常组织40例。采用免疫组织化学技术及荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测Pokemon在结直肠癌、结直肠腺瘤及正常结直肠黏膜中的表达。结果免疫组织化学技术结果显示正常结直肠黏膜、结直肠腺瘤、结直肠癌中Pokemon的阳性表达率分
目的研究炎性因子相关退变椎间盘基因表达谱芯片数据,应用生物信息学方法挖掘炎性因子作用后退变椎间盘的关键差异表达基因,探讨其相关信号通路及相互作用网络。方法选择同一芯片平台的两组椎间盘退变患者的基因表达谱数据集:GSE41883[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)作用于退变椎间盘细胞]和GSE27494[白细胞介素-1β(IL-1β)作用于退变椎间盘细胞],采用R语言分别筛选两组数据集中的差异表达基因,
目的观察Notch信号通路的特异性阻断剂——γ-分泌酶抑制剂(DAPT)对毛囊干细胞(rHFSCs)诱导分化为血管内皮细胞(ECs)效率的影响。方法运用改良的rHFSCs分离培养、纯化鉴定的方法得到种子细胞,并用透射电镜观察其内部结构。用10 μg/L血管内皮生长因子165(VEGF165)作为诱导因子进行诱导,流式细胞仪检测分化效率。用不同浓度DAPT(0.5、1.0 μmol/L)进行抑制,将
目的观察丙泊酚麻醉对创伤性脑损伤(TBI)大鼠的影响。方法将SD大鼠分为假手术组、模型组、丙泊酚低剂量组[36 mg/(kg·h)]和丙泊酚高剂量组[72 mg/(kg·h)],每组20只。于TBI术前30 min至术后1.5 h静脉注射给药,观察大鼠术后的死亡率,神经功能和神经元再生状况。结果术后28 d,丙泊酚低剂量组大鼠死亡率显著高于模型组大鼠死亡率,差异有统计学意义(χ2=7.648,P=
目的探讨肾脏肿瘤测量评分系统(R.E.N.A.L.评分系统)在肾部分切除术中的临床应用价值,并分析影响肾部分切除术危险因素。方法分析83例行肾部分切除术患者的临床资料,采用R.E.N.A.L.评分系统将肾癌患者分为低难度组、中难度组、高难度组,比较分析各组间手术时间、术中出血量、热缺血时间、术后住院时间、术后血肌酐、术后并发症等围手术期指标差异,并分析R.E.N.A.L.评分与术后并发症的关系,同
期刊