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[期刊论文] 作者：谭艳,王家宁,郭凌郧,罗超,
来源：郧阳医学院学报 年份：2008
目的：将PCR扩增产物人内皮型一氧化氮合酶（heNOS）cDNA定向克隆到载体pShuttle—IRES—hrGFP--2以构建重组质粒pShuttle—heNOS—EGFP。方法：在扩增目的基因的PCR引物5′端加上与...
[期刊论文] 作者：董晓, 王家宁, 黄永章, 郭凌郧,,
来源：郧阳医学院学报 年份：2005
目的:利用中间载体pGEM-T easy vector构建表达型载体pET15b-EGFP,在大肠杆菌中高效表达可溶性蛋白EGFP并将其纯化。方法:以质粒pLEGFP-C1为模板采用聚合酶链反应(PCR)的方法...
[期刊论文] 作者：姚玲玲, 王家宁, 黄永章, 郭凌郧,,
来源：南方医科大学学报 年份：2006
目的构建pET15b-PEP-1-CAT原核表达质粒,并表达、纯化得到融合蛋白PEP-1-CAT,为防治与氧化应激有关的疾病奠定基础。方法设计并合成两端分别带SalI和BglII酶切位点的CAT引物,...
[期刊论文] 作者：郭光云,陈功,郭凌郧,王家宁,,
来源：中国防痨杂志 年份：2005
目的探讨结核蛋白芯片、痰涂片抗酸染色及结核菌素(PPD)皮试单独和联合检测对肺结核患者临床诊断的意义。方法对45例肺结核和30例非结核性肺疾病患者,同时进行结核蛋白芯片、...
[期刊论文] 作者：董晓,王家宁,黄永章,郭凌郧,
来源：南方医科大学学报 年份：2006
目的 表达并纯化融合蛋白PEP—1-EGFP以对其穿透细胞膜的能力进行研究。方法 用分子克隆技术构建出表达型载体pET15b—pep—1—EGFP，在大肠杆菌Ecoli BL21（DE3）中表达融合蛋白PE...
[期刊论文] 作者：姚玲玲,王家宁,黄永章,郭凌郧,
来源：郧阳医学院学报 年份：2006
目的：利用同尾酶技术构建pET15b-PEP-1-CAT重组质粒，为制备PEP-1-CAT融合蛋白进而为防治心肌缺血再灌注损伤奠定基础。方法：设计并合成两端分别带salⅠ和BglⅡ酶切位点的CAT引物...
[期刊论文] 作者：王家宁, 黄永章, 孔霞, 郭凌郧,
来源：郧阳医学院学报 年份：2004
目的:利用细菌内同源重组快速构建重组腺病毒质粒和制备重组腺病毒.方法:制备感受态BJ5183,将pAdEasy-1转化BJ5183,制备含pAdEasy-1的BJ5183感受态,将线性化的pShuttle-CMV-L...
[期刊论文] 作者：王家宁, 王传成, 郭凌郧, 黄永章,,
来源：郧阳医学院学报 年份：2006
目的:采用体外连接法构建和制备重组腺病毒Adeno-X-LacZ,为构建具有治疗价值的重组腺病毒载体奠定基础。方法:PI-SceⅠ/I-CeuⅠ酶切pShuttle2-LacZ穿梭质粒,回收4.6 kb的LacZ...
[期刊论文] 作者：陈思思,王家宁,黄永章,郭凌郧,郑飞,
来源：郧阳医学院学报 年份：2009
目的：构建原核表达载体pET15b-YARA-EGFP，并进行YARA-EGFP融合蛋白的表达和纯化。方法：用分子克隆技术构建出表达型载体pETl5b-YARA-EGFP，在E.coli BL21（DE3）中表达融合蛋白YARA-EG...
[期刊论文] 作者：陈思思,王家宁,黄永章,郭凌郧,孔霞,,
来源：湖北医药学院学报 年份：2012
目的:研究细胞穿透肽YARA介导大分子蛋白穿透人血管平滑肌细胞(human vascular smooth muscle cells,HVSMC)细胞膜的能力。方法:用基因工程的方法制备并纯化YARA-EGFP融合蛋...
[期刊论文] 作者：董晓,王家宁,黄永章,郭凌郧,孔霞,,
来源：癌症 年份：2007
背景与目的：细胞穿透肽是近年来发现的一类能介导大分子物质跨膜转导的小分子肽段．本实验研究细胞穿透肽PEP—1携带大分子蛋白穿透人结直肠癌细胞SW480的能力。方法：用基因工程......
[期刊论文] 作者：董晓,王家宁,黄永章,郭凌郧,孔霞,
来源：郧阳医学院学报 年份：2007
目的：研究细胞穿透肽PEP-1携带大分子蛋白穿透入平滑肌细胞的能力。方法：用基因工程的方法制备并纯化EGFP蛋白和PEP-1-EGFP融合蛋白，将纯化后的两种蛋白和培养的人平滑肌细胞共...
[期刊论文] 作者：姚玲玲,王家宁,黄永章,郭凌郧,孔霞,,
来源：中华心血管病杂志 年份：2004
目的采用体外培养的人脐静脉内皮细胞株(CRL-1730),研究 PEP-1肽介导人过氧化氢酶(CAT)穿透细胞的能力,并探讨 PEP-1-CAT 对过氧化氢(H_2O_2)诱导的内皮细胞氧化应激损伤是否...
[期刊论文] 作者：董晓,王家宁,黄永章,郭凌郧,孔霞,,
来源：中国医学科学院学报 年份：2007
目的 研究PEP-1-EGFP融合蛋白穿透人脐静脉内皮细胞的能力.方法 用基因工程的方法制备并纯化EGFP蛋白和PEP-1-EGFP融合蛋白,将纯化后的两种蛋白和体外培养的人脐静脉内皮细胞...
[期刊论文] 作者：姚玲玲, 王家宁, 黄永章, 陈龙, 郭凌郧, 孔霞,,
来源：郧阳医学院学报 年份：2004
目的:采用体外培养的人脐静脉内皮细胞株(CRL-1730),研究PEP-1肽介导人过氧化氢酶穿透细胞的能力。方法:构建原核表达质粒pET15b-PEP-1-CAT,将其在基因工程菌中表达出N端带有...
[期刊论文] 作者：陈思思,王家宁,黄永章,郭凌郧,孔霞,郑飞,,
来源：贵州医药 年份：2017
目的构建原核表达载体pET15b-YARA-EGFP,表达并纯化出融合蛋白YARA-EGFP,观察其穿透人结直肠癌细胞的情况。方法用分子克隆技术构建出表达型载体pET15b-YARA-EGFP,在E.coli B...
[期刊论文] 作者：董晓伟, 王家宁, 唐俊明, 孔霞, 郭凌郧,,
来源：郧阳医学院学报 年份：2011
目的:研究PEP-1-SOD1融合蛋白转导入大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的能力及其在缺氧无血清条件下对MSCs的保护作用。方法:将纯化后的SOD1和PEP-1-SOD1蛋白分别加入到培养及鉴定...
[期刊论文] 作者：姚玲玲,王家宁,黄永章,陈龙,郭凌郧,孔霞,
来源：郧阳医学院学报 年份：2007
目的：采用体外培养的人脐静脉内皮细胞株（CRL-1730），研究PEP-1肽介导入过氧化氢酶穿透细胞的能力。方法：构建原核表达质粒pET15b—PEP-1-CAT，将其在基因工程菌中表达出N端带有6个组......
[期刊论文] 作者：王家宁,郭凌郧,孔霞,郑飞,谭艳,黄永章,
来源：第四军医大学学报 年份：2008
目的：将人过氧化氢酶（Catalase,CAT）cDNA的PCR扩增产物定向克隆到pET15b载体上以构建重组质粒pET15b-CAT.方法：扩增目的基因的PCR引物的5′端加上与线性化载体同源的碱基序列,以...
[期刊论文] 作者：王家宁,郭凌郧,谭艳,郑飞,孔霞,黄永章,
来源：郧阳医学院学报 年份：2008
目的:将人过氧化氢酶(Catalase,CAT)cDNA的PCR扩增产物定向克隆到pET15b载体上以构建重组质粒pET15b-CAT,并表达和纯化出His-tag-CAT融合蛋白。方法:扩增目的基因的PCR引物的...
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