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我国目前批准使用的狂犬病疫苗包括细胞培养弱毒疫苗和进口的灭活苗,前者在发达国家已禁止用于犬和猫等动物,因为具有潜在的毒力返祖的可能性;后者免疫效果较好,但价格较高,国内的狂犬病灭活疫苗迄今没有研究报道。本研究利用BHK-21细胞分别培养狂犬病病毒强毒固定毒株CVS-11和弱毒疫苗株SRV9,对于病毒滴度达到108TCID50/0.1mL的培养液,经0.025%甲醛溶液灭活后,再加入适量的氢氧化铝胶佐剂混合成疫苗,分别通过肌肉注射1mL免疫12条犬,同时设SRV9弱毒活疫苗和英特威灭活疫苗(Nobivac Rabies Vaccine)阳性对照和正常BHK-21细胞阴性对照的免疫犬10条。免疫结果显示,CVS-11和SRV9灭活苗诱导的抗体水平无显著差异。一次免疫后3周内抗体水平达到最高,中和抗体效价平均为5.2IU。抗体消长规律研究表明,灭活疫苗一次免疫诱导的最低保护水平的中和抗体(≥0.5IU)可持续5～6个月;单剂量和10头份剂量注射动物后均未见免疫动物呈现异常反应。免疫后3个月时进行攻毒试验,结果表明,两种灭活苗免疫的10条犬均能抵抗40000 MICLD50强毒(CVS-24)攻击而健康存活。在另一项实验中,初免后的犬在3个月时加强免疫,可激发较强的回忆反应,抗体水平加强免疫后可达到6-I0.5IU,加强免疫后最低保护水平的中和抗体水平(≥0.5IU)可维持12个月以上。保存试验显示,灭活疫苗在4℃可保存12个月,免疫效果保持不变。几种疫苗免疫效果比较,英特威灭活疫苗诱导的中和抗体水平最高,弱毒活苗效果次之,本研究的两种灭活疫苗诱导的中和抗体水平相似,比弱毒活苗抗体水平稍低,但足以对免疫动物提供完全的保护,符合狂犬病新型疫苗的要求。本研究获得的狂犬病灭活疫苗制备简单,成本在一元/头份左右。以上结果表明,本研究研制的狂犬病灭活疫苗安全,有效,廉价,可以作为我国犬狂犬病的预防用疫苗。