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本文旨在观察Pluronic F-127温敏型水凝胶复合Lingo-4 shRNA慢病毒表达载体移植对脊髓损伤大鼠神经修复的影响,探讨其促进神经再生和机体功能恢复的作用及机制。研究采用脊髓全横断大鼠模型,构建Lingo-1 shRNA慢病毒表达载体并感染原代少突胶质细胞检测其干扰效果,制备Pluronic F-127水凝胶均匀包裹Lingo-1 shRNA慢病毒表达载体,用微量注射器定位注射于大鼠脊髓损伤部位,并分组观察。实验应用HE及尼氏染色观察神经细胞存活,用RT-PCR、westernblot、免疫荧光等观察脊髓神经发生的变化,电镜观察脊髓超微结构变化,并采用BBB评分法评价大鼠后肢功能恢复情况。结果:(1)实验所构建Lingo-1shRNA慢病毒表达载体能感染少突胶质细胞,并阻断Lingo-1基因表达及其信号通路的激活。(2)Pluronic F-127能均匀包裹Lingo-1 shRNA慢病毒表达载体,移植后能成功感染脊髓细胞。(3)与对照组相比,Pluronic F-127温敏型水凝胶复合Lingo-1 shRNA慢病毒表达载体处理组对脊髓损伤大鼠影响如下:1.明显抑制神经细胞Lingo-1基因及蛋白表达;2.HE及尼氏染色显示脊髓前角神经细胞存活数目明显增加(P<0.01);3.增加成熟神经细胞微管相关蛋白2(MAP2)及Doublecortin蛋白的表达(P<0.01);4.增加神经丝蛋白200(NF-200)和神经巢蛋白(nestin)等神经干细胞标志蛋白的表达(P<0.01);5.增加突触蛋白(synapsin)和神经生长因子受体蛋白(NGFR)的表达(P<0.01).6.增加神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和髓鞘碱性蛋白抗体(MBP)的表达(P<0.01);7.电镜观察超微结构,对照组脊髓损伤后轴突髓鞘板层松散、厚度变薄、分布稀疏、线粒体膨大,而Pluronic F-127水凝胶与Lingo-1 shRNA植入组轴突髓鞘较致密,板层松散不明显,厚度较正常,细胞器基本结构正常;8.脊髓损伤后1、7、14、28d对不同处理组大鼠运动功能恢复进行BBB评分,结果显示实验组在7、14、28d其运动功能恢复BBB评分均明显优于对照组,明显促进脊髓损伤动物肢体运动功能恢复。研究提示P1uronic F-127温敏型水凝胶复合Lingo-1 shRNA移植能明显促进脊髓损伤大鼠神经再生与功能修复,其机制可能与其促进神经发生和髓鞘再生、保护神经元存活及突触重建等有关。本研究为应用P1uronic F-127温敏型水凝胶生物支架联合LINGO-1 RNAi的策略治疗脊髓损伤提供了实验依据。