【摘 要】
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目的:本实验通过流式细胞术检测细胞凋亡,确定三氧化二砷(As2O3)及传统化疗药物对神经母细胞瘤(NB)细胞株SK-N-SH的毒性作用及半数杀伤浓度(IC50).证实As2O3、DDP及VP16对SK-N-SH细胞株耐药蛋白P-gp表达和细胞周期的影响.方法:首先培养NB的SK-N-SH细胞株,然后采用流行细胞术Annexin V/PI法检测As2O3及传统化疗药物对SK-N-SH细胞株细胞凋亡的
【机 构】
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中山大学孙逸仙纪念医院儿科血液/肿瘤专科 广州,510120
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目的:本实验通过流式细胞术检测细胞凋亡,确定三氧化二砷(As2O3)及传统化疗药物对神经母细胞瘤(NB)细胞株SK-N-SH的毒性作用及半数杀伤浓度(IC50).证实As2O3、DDP及VP16对SK-N-SH细胞株耐药蛋白P-gp表达和细胞周期的影响.
方法:首先培养NB的SK-N-SH细胞株,然后采用流行细胞术Annexin V/PI法检测As2O3及传统化疗药物对SK-N-SH细胞株细胞凋亡的影响及IC50;通过Western blot检测SK-N-SH细胞中P-gp的表达以及As2O3或传统化疗作用后对其表达的影响;用流式细胞术对As2O3及传统化疗药物作用后的细胞进行细胞周期分析.
结果:随着As203给药浓度的增加细胞凋亡数增加,As2O3对SK-N-SH细胞的杀伤作用呈现浓度依赖性;同浓度As2O3作用于SK-N-SH细胞时,As2O3对SK-N-SH细胞的杀伤作用呈现时间依赖性。SK-N-SH细胞的IC50(As2O3)=3μmol/L。
结论:As2O3对SK-N-SH细胞的杀伤作用呈浓度及时间依赖性,1C50(As2O3)=3μmol/L.As2O3能够使SK-N-SH细胞的细胞周期明显阻滞在G2/M期。DDP和VP16能够使SK-N-SH细胞的细胞阻滞在S期。As2O3不会增加SK-N-SH细胞耐药蛋白P一的表达,且IC50(As2O3)可以降低SK-N-SH细胞P-gP的表达;而传统化疗药物DDP和VP16则会增加SK-N-SH细胞耐药蛋白P-gP的表达。
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