【摘 要】
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目的研究STAT4 rs7574865与HBV-HCC发病风险及预后的关联性并初步探讨STAT4调控CYP2E1在HCC发生发展中的作用机制。方法本研究采用Sequenom MassArray法对HBV-HCC患者和健康
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目的研究STAT4 rs7574865与HBV-HCC发病风险及预后的关联性并初步探讨STAT4调控CYP2E1在HCC发生发展中的作用机制。方法本研究采用Sequenom MassArray法对HBV-HCC患者和健康人各500例进行STAT4rs7574865基因分型,Logistic回归分析STAT4rs7574865与HBVHCC发生风险进行关联性分析。随访记录314例肝癌患者的死亡时间,采用单因素和多因素的方法对预后生存期影响因素进行统计分析。用ELISA检测STAT4rs7574865不同基因型的血液和组织STAT4的表达水平;流式细胞仪检测L02和HepG2细胞的细胞周期和凋亡:Transwell小室检测STAT4 siRNA对L02、HepG2细胞迁移及侵袭能力的影响;qPCR和westernblot检测STAT4、CYP2E1的水平;荧光素酶报告基因检测STAT4对CYP2E1的启动子区域的调控。结果 STAT4 rs7574865G等位基因是HBV-HCC风险基因,在两组中STAT4的表达水平GG型明显高于TT型(P<0.05),携带GG型的HCC患者死亡风险增加:STAT4siRNA促进细胞凋亡和抑制生长周期,明显抑制L02、HepG2细胞的迁移和侵袭(P<0.01);在肝组织中STAT4与CYP2E1的代谢活性Clint和Vmax呈正相关(P<0.05);qPCR和westernblot显示siRNA-STAT4明显抑制STAT4、CYP2E1的表达(P<0.01);STAT4调控CYP2E1的启动子区域。结论 STAT4在HCC发生发展中起着重要作用,且rs7574865G等位基因可能作为一种预后标志物;STAT4可通过调控CYP2E1的启动子区域影响其转录后翻译,从而影响HCC发生发展,为发现HCC新治疗靶点提供一定的理论依据。
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