目的测定先兆子病孕妇外周血和脐血NK细胞增殖能力和杀伤功能,以探讨先兆子痫的发病机制。方法:①外周血及脐血NK细胞分离和计数:无菌采集受试者空腹外周静脉血2ml,并于分娩时采集新生儿脐静脉血2ml,均肝素抗凝,用淋巴细胞分层液(中国医学科学院)分离单个核细胞,加至Percoll不连续密度梯度分层液(Pharmacia公司)表面,离心后收集42.5%和45%Percoll液层,再行离心、洗涤并计数。②NK细胞增殖活性测定(MTT法):将所获取的外周血NK细胞和对数期生长的NK-92细胞按1×104/孔接种于96孔板,在rhIL-2为100U/ml条件下培养,每一组设3个复孔,37℃5%CO2孵育22h,加入5mg/ml MTF (Sigma公司)10μl/每孔,继续培养4h,吸弃上清100μl/孔,再加入二甲基亚砜(天津化学试剂二厂)100μl/孔,10min后光镜下观察,待结晶状甲月替完全溶解后测OD570-630nm值。③NK细胞杀伤功能测定(51Cr释放法):收集处于对数生长期的K562细胞,调整浓度为2.0×106/ml(活细胞数>95%),1.0×106个细胞加Na251CrO4(Amersham公司)100μCi,置37℃水浴,标记90min,每15min摇动一次;继而洗涤3次,调整细胞浓度为1.0×105/ml,取100μ/孔加入96孔板中作为靶细胞。效应细胞为所制备的NK细胞和对数期生长的NK-92细胞,按不同效/靶比(5:1、2.5:1及1:1)加入含已标记51Cr的K562(100μl/孔),置37℃5%CO2孵育4 h,收集上清100μl/孔,用r-计数仪检测51Cr释放的cpm值,杀伤率计算公式为:特异性杀伤率(%)=×100%。结果:①先兆子痫患者母血及脐血NK细胞数均显著高于正常孕妇(P<0.05);②先兆子痫患者母血及脐血NK细胞增殖能力高于正常孕妇(P<0.05);③先兆子痫患者母血及脐血NK细胞杀伤功能高于正常孕妇(P<0.05)。结论:NK细胞的数量及功能变化在先兆子病的发病中起重要作用。