【摘 要】
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为了解P-糖蛋白基因在捻转血矛线虫伊维菌素耐药株和敏感株间的差异,以进一步弄清该基因与伊维菌素耐药性产生的关系,本实验以羊捻转血矛线虫伊维菌素耐药虫株和敏感虫株作为
【机 构】
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农业部动物临床诊疗技术重点实验室内蒙古农业大学兽医学院;
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为了解P-糖蛋白基因在捻转血矛线虫伊维菌素耐药株和敏感株间的差异,以进一步弄清该基因与伊维菌素耐药性产生的关系,本实验以羊捻转血矛线虫伊维菌素耐药虫株和敏感虫株作为研究对象,用PCR-RFLP方法进行分析。首先分别提取其基因组DNA,再以引物HSF-HSR扩增hcpgp-1基因片段,然后将PCR产物纯化后克隆至pGM-T载体,经PCR鉴定后,将阳性菌落DNA菌液送往测序公司测序。测序完成后,对序列结果分析并选取内切酶KpnⅠ进行酶切。结果表明:捻转血矛线虫伊维菌素敏感株虫体PCR产物不能被内切酶切开,而伊维菌素耐药株虫体PCR产物可被内切酶切开;酶切后统计显示,在所检测的10条伊维菌素耐药性虫株中,抗性纯合子(rr)3个,杂合子(rS)6个,敏感性纯合子(SS)1个,不同基因型的频率为rr的个体占30%,而rS个体达60%,SS个体为10%。因此,本研究通过分析P-糖蛋白hcpgp-1基因在在捻转血矛线虫伊维菌素耐药株和敏感株间片段的多态性,为进一步了解P-糖蛋白在捻转血矛线虫伊维菌素耐药性产生中的作用提供了参考,也为研究捻转血矛线虫对常用驱虫药的耐药性产生机理奠定了基础。
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