引言/目的:2009年4月,新型猪源H1N1亚型流感病毒(即甲型H1N1流感病毒)出现在墨西哥等地,随后在全球迅速传播,引发本世纪第一次流感大流行。作为一种人畜共患的流感病毒,其有可能通过基因突变来增强对哺乳动物的致病性,对公共卫生安全构成潜在危害。小鼠作为一种哺乳动物模型,被广泛应用于流感病毒致病机理的研究。本研究以BALB/c小鼠作为哺乳动物模型,研究新型猪源H1N1亚型流感病毒感染哺乳动物的致病机理。材料与方法:将一株甲型H1N1流感病毒A/Changchun/01/2009(H1N1)鼻内接种BALB/c小鼠,两天后取鼠肺,制成肺匀浆后鼻内接种下一只BALB/c小鼠,如此连续传代18次,获得致病性增强的甲型H1N1流感病毒鼠适应株;采用小鼠半数致死量(MLD50)、体重变化率、生存率、组织嗜性、体内/体外复制动力学等指标评价鼠适应株的生物学特性;全基因组测序分析鼠适应株病毒蛋白上出现的氨基酸残基突变;反向遗传技术拯救重组病毒并验证突变位点对病毒生物学特性的影响;通过微基因组实验初步探讨鼠适应株致病性增强的分子机制。结果与讨论:鼠适应株的体外和体内复制能力均显著增强,且能够在脑内复制;鼠适应株共计发生6处氨基酸残基突变,分别是PB1-T296R、PA-I94V、HA-N159D、HA-D225G、HA-R226Q和NP-D375N。通过反向遗传技术,发现PB1-T296R突变能显著增强甲型H1N1流感病毒的体外和体内复制能力、扩大病毒的组织嗜性、增强病毒的聚合酶活性及对BALB/c小鼠的致病性。结论:本研究发现一个新的流感病毒毒力分子标记PB1-T296R,为今后研究流感病毒感染哺乳动物的致病机理奠定基础。