目的 探讨自吞噬在电离辐射之后细胞命运决定中的作用及其分子机制。方法 采用慢病毒感染的方法构建稳定敲低p53及对照A549细胞系,用血清饥饿诱导细胞自吞噬,3-MA抑制Beclin 1/Vps34介导的自吞噬,然后用γ射线照射细胞。采用流式细胞检测细胞周期的分布及细胞凋亡率。采用双荧光素酶报告系统检测目的基因的转录活性。结果 p53抑制自吞噬效应蛋白p62/SQSTM1在DNA放射损伤情况下的转录激活,这可能是p53抑制自吞噬的新的分子机制。同时也发现激活自吞噬可以促进电离辐射之后细胞的存活,而抑制自吞噬则可以抑制细胞存活,说明自吞噬在电离辐射之后的细胞命运决定中起着关键作用。进一步研究发现,抑制自吞噬可以抑制电离辐射诱导的细胞周期阻滞,从而揭示了DNA损伤诱导G2/M周期阻滞及自吞噬诱导细胞存活之间的联系。另一方面,为了研究电离辐射诱导自吞噬的分子机制,采用免疫共沉淀的方法检测细胞内源性Beclin 1与一个抑制凋亡蛋白X的相互作用。蛋白X可以通过结合Beclin 1来抑制其自吞噬活性。结果发现电离辐射可以诱导蛋白X与Beclin 1发生解离。结论 以上研究结果表明,电离辐射诱导Beclin 1与其抑制蛋白X发生解离,从而使得Beclin 1的自吞噬活性得以激活,从而阐明了电离辐射诱导细胞发生自吞噬的新的分子机制；另一方面,自吞噬的激活对可以促进电离辐射之后细胞的存活,而抑制自吞噬可以提高细胞对辐射的敏感性。