酒精性肝损伤大鼠肠道紧密连接的改变及中药柔肝固肠方的干预作用

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目的:观察酒精性肝损伤大鼠肠道紧密连接蛋白ZO-1、Occludin的变化及中药柔肝固肠方的影响,以探讨该方防治酒精性肝损伤肠渗漏的作用机制。方法:复制Lieber-DeCarli酒精性肝损伤模型;30只雄性SD大鼠随机分为无酒精液体饲料组(对照组,n=10)、酒精液体饲料组(模型组,n=10)及酒精液体饲料+柔肝固肠方组(柔肝固肠方组,n=10)。在造模第3周开始灌胃给药或蒸馏水直至6周末。禁食5 h后,各组复以10 mg/kg的内毒素(L PS)灌胃,并在灌胃3.5 h后取其门静脉血浆和下腔静脉血清及肝肠组织,检测方法及指标如下:(1)WB检测小肠组织ZO-1及Occludin蛋白表达;(2)RT-PCR检测小肠组织ZO-1及Occludin mRNA表达;(3)免疫组化法观察小肠组织ZO-1的蛋白定位。结果:(1)与对照组相比,模型组ZO-1及Occludin蛋白表达显著降低,ZO-1 mRNA相对定量值与对照无显著差异,Occludin mPNA相对定量值较对照组显著降低;(3)中药柔肝固肠方ZO-1、Occludin蛋白表达及mRNA相对定量值与模型组相比均显著升高。结论:酒精性肝损伤大鼠有显著的肠道紧密连接蛋白ZO-1、Occludin损伤;中药柔肝固肠方可显著升高ZO-1、Occludin的蛋白及基因表达、改善肠道紧密连接,这可能是该方防治酒精性肝损伤肠渗漏的重要机制之一。
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