【摘 要】
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根据高致病性猪蓝耳病病毒（PRRSV）的NSP2基因序列设计合成引物和TaqMan荧光探针,建立了高致病性猪蓝耳病荧光RT-PCR检测方法。该方法灵敏度比常规RT-PCR高100倍,对PRRSV细胞培
【机 构】
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北京出入境检验检疫局; 中国农业大学;
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根据高致病性猪蓝耳病病毒（PRRSV）的NSP2基因序列设计合成引物和TaqMan荧光探针,建立了高致病性猪蓝耳病荧光RT-PCR检测方法。该方法灵敏度比常规RT-PCR高100倍,对PRRSV细胞培养物的检测下限可达1个TCID50;特异性强,仅能特异性的检测出高致病性猪蓝耳病病毒;同时根据灵敏度实验建立的标准曲线能够对PRRSV RNA进行相对定量。用该方法对收集的正常临床样本和2007年某发病猪场送检的猪血清和多种组织样品进行检测。结果发现,高致病性猪蓝耳病荧光RT-PCR方法与病毒分离方法的阳性符合率为100%,且通过对阳性病料中不同组织感染RNA的相对定量,初步探讨了PRRSV在猪体内的感染规律。通过对临床样本的检测,表明建立的高致病性猪蓝耳病荧光RT- PCR方法具有良好的特异性和重复性,可应用于高致病性猪蓝耳病的检测,满足当前对PRRS疫情的防控需要。
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