【摘 要】
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锌指蛋白(ZFP,Zinc Finger Proteins)是植物一大类重要的转录调控因子,参与一些重要的调控过程,如:形态建成、花粉发育、胁迫反应、胚发育等。本研究从抗旱耐盐的木本植物刚毛
【机 构】
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东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室;
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锌指蛋白(ZFP,Zinc Finger Proteins)是植物一大类重要的转录调控因子,参与一些重要的调控过程,如:形态建成、花粉发育、胁迫反应、胚发育等。本研究从抗旱耐盐的木本植物刚毛柽柳转录组数据中鉴定了一条盐胁迫响应的锌指蛋白基因,命名为ThZFP3。ThZFP3基因全长1215bp,编码404个氨基酸,编码蛋白质的相对分子质量100.31kDa,理论等电点(PI)为5.0。利用RT-qPCR分析,ThZFP3基因受Na Cl、PEG6000胁迫和外源ABA处理下在刚毛柽柳根和叶中的表达都发生了显著的改变,可能参与了刚毛柽柳抗旱耐盐胁迫应答。为了进一步研究ThZFP3基因的功能,构建了植物过表达载体pROKⅡ-ThZFP3和RNAi抑制表达载体,并进行刚毛柽柳瞬时转化,同时以pROKⅡ转化柽柳作为对照,获得过表达(OE)、抑制表达(RNAi)和对照(VC)转基因植株。分析比较在150mmol·L-1Na Cl胁迫后3种转基因植株的生理变化。与抑制表达(RNAi)和对照(VC)转基因植株相比,盐胁迫下过表达植株(OE)的DAB和NBT染色强度最低,MDA和H2O2含量较低,而SOD和POD活性较高,表明过表达ThZFP3提高了抗氧化酶类的活性,减少了O2-·和H2O2在植物中的积累。过表达植株(OE)的脯氨酸含量增加,而电解质渗透率和伊文思蓝(Evans blue)染色强度较低,表明过表达ThZFP3降低了盐胁迫对细胞膜的损伤程度。以上这些结果表明ThZFP3通过减少ROS积累和膜损伤程度以及增加抗氧化酶的活性,从而提高柽柳的耐盐能力。
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