【摘 要】
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目的 研究一种医用消毒耦合剂的细胞毒性,以期了解其使用的安全性,为临床合理使用提供依据.方法 实验组设立6个剂量组,最高剂量组为终浓度5.00 g·L-1,以3倍间距往下设1.67,0.56,0.19,0.06,0.02 g·L-1剂量组.称取受试样品1.00 g,经紫外灯照射2h后,用DMEM完全培养液配至20 ml,受试物浓度为50 g·L-1,然后用DMEM完全培养液按照体积比1∶2,1∶8
【机 构】
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山东省疾病预防控制中心毒理所,山东济南250014 山东师范大学生命科学学院,山东济南250000
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目的 研究一种医用消毒耦合剂的细胞毒性,以期了解其使用的安全性,为临床合理使用提供依据.方法 实验组设立6个剂量组,最高剂量组为终浓度5.00 g·L-1,以3倍间距往下设1.67,0.56,0.19,0.06,0.02 g·L-1剂量组.称取受试样品1.00 g,经紫外灯照射2h后,用DMEM完全培养液配至20 ml,受试物浓度为50 g·L-1,然后用DMEM完全培养液按照体积比1∶2,1∶8,1∶26,1∶80和1∶249比例稀释,受试物浓度分别为16.7,5.6,1.9,0.6和0.2 g·L-1.同时设立阴性对照组(DMEM完全培养液)和阳性对照组(终浓度5 g·L-1苯酚).取对数生长期L929细胞,消化,以DMEM完全培养液调整细胞密度为1 ×107 L-1,将细胞悬液接种于3块96孔培养板中,每孔100 μl,每组设6个平行孔.置5％ CO2,37℃培养24 h后,各实验组分别加入11 μl受试物,阴性对照组加入11 μl完全细胞培养液,阳性对照组加入5.0 μl苯酚溶液100 g·L-1(以DMEM完全培养液配制).混匀,于5％CO2,37℃培养.分别于1,3和7d进行细胞形态观察,判定毒性级别.观察后,吸去各孔培养液,换用100 μl DMEM非完全培养液,加入20 μl/孔 MTT 5 g·L-1,继续培养4h.培养结束后,弃去培养液,用150 μl DMSO溶解紫色结晶,连续光谱酶标仪570 nm波长测定A值,计算RGR值,判定毒性级别.结果 小鼠L929成纤维细胞在该医用消毒耦合剂的作用下,5.00,1.67, 0.56和0.19mg·ml-1剂量组在各时间点出现1级到4级毒性的形态学改变,且有明显的剂量-反应关系；MTT实验显示,各剂量组各时间点相对增殖率(RGR值)均降低,毒性级别为1级到4级,呈现明显的剂量-反应关系.结论 该医用消毒耦合剂有明显的细胞毒性.
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