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目的:探讨肾必宁对系膜增生性肾炎(MsPGN)大鼠系膜细胞凋亡及其调控基因Fas/FasL 的影响。方法:建立慢血清病大鼠MsPGN模型。将动物适应性喂养一周,尿蛋白检测为阴性, 模型组及治疗组动物腹腔注射戊巴比妥钠(20~30mg/kg)麻醉,常规消毒后经背部切除左侧肾脏, 休养一周,预免疫:实验鼠足垫皮下注射完全弗氏佐剂0.1ml加3mgBSA,于1、2周末加强2次。 3周末,腹腔连续注射4次BSA,间隔时间1小时,注射剂量分别为0.5、1.0、1.5、3.0mg;次日晨加强1次(2mg/只)。之后每日腹腔注射BSA,剂量从每只0.5mg开始,每日增加0.5mg至5.0mg.继续每周加量1mg至10mg为止。给药方法及剂量:治疗组:于造模5周后(尿蛋白检测多为++~ +++)开始每日早8时灌服肾必宁颗粒4.3g/kg,按1ml/100g体重的量配成一定浓度的溶液,直至 12周末造模结束。每1g成药相当于生药2.38g;模型组:每日给予等量的生理盐水;正常组:不予任何处理。肾组织病理检测:于12周末处死大鼠后,取少量肾组织,常规制片,作HE染色。光镜观测肾脏病理变化。肾组织细胞凋亡的检测:采用原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡。方法按试剂盒说明进行。光镜下每份标本计数200个系膜细胞及阳性细胞(细胞核固缩、碎裂、呈棕色颗粒)。按阳性细胞/细胞总数×100%计算凋亡率。肾小球系膜区免疫组化Fas、FasL的检测:具体方法为SABC三步法。低倍镜下观察背景颜色,高倍镜下观察肾小球系膜区染色强度并按如下标准记分:阴性0分,弱阳性2分,阳性4分,强阳性6分。PCNA检测:具体方法按试剂盒说明操作。结果判断:棕黄色颗粒,位于细胞核,背景无颜色。计算肾小球系膜区表达PCNA 的细胞占细胞总数的百分比:1.25%-“+”,25.50%-“++”,50%以上-“+++”。结果:肾必宁可明显促进Fas在肾小球系膜区的表达,降低PCNA的表达,逆转系膜增殖,减轻病理损害,且与系膜细胞凋亡率呈正相关,治疗组与模型组相比具有显著性差异(P<0.05)。结论:肾必宁可能通过调控Fas/FasL在肾小球系膜区的表达而诱导系膜细胞凋亡,进而抑制系膜增殖。