强心复脉方改善受损兔窦房结细胞HCN4蛋白磷酸化的实验研究

来源 :世界中医药学会联合会第二届老年医学专业委员会换届会暨2015学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liangmin888
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  目的 超极化激活的环核苷酸门控阳离子流(If)一直被认为与窦房结的起搏功能密切相关,HCN4是If通道的主要组成部分,而HCN4的活性取决于蛋白激酶A(PKA)信号转导通路介导的磷酸化程度.本文拟从HCN4通道蛋白磷酸化角度探讨强心复脉方提高受损窦房结细胞起搏功能,进而治疗病态窦房结综合征的分子机制.方法 通过免疫印迹、荧光定量等方法检测缺血再灌注损伤窦房结细胞起搏电流If相关通道蛋白HCN4蛋白磷酸化水平和蛋白激酶A活性.结果 窦房结细胞经缺血再灌注损伤模型方法造模后,窦房结细胞HCN4蛋白磷酸化表达光密度值(OD值)及细胞内蛋白激酶A (PKA)活性均明显降低(P<0.05),给予强心复脉方含药血清后高、中、低剂量组与模型组相比,OD值及PKA活性均有不同程度升高,空白血清组较模型组无明显改善.结论 强心复脉中药具有提高窦房结细胞缺血再灌注损伤模型HCN4磷酸化的光密度值、增强细胞内蛋白激酶A活性的作用.强心复脉方是国医大师刘志明老中医的经验方,具有益气通阳复脉之功,实验研究结果显示该方可能是通过上调窦房结细胞内If电流相关离子通道HCN4蛋白磷酸化的表达来增强If电流,进而增加窦房结细胞自律性,从而达到增加心率,治疗病态窦房结综合征的目的.该研究也进一步证实If是心脏起搏活动中的重要电流,If通道蛋白HCN4蛋白磷酸化水平异常是病态窦房结综合征产生的分子基础,同时受PKA信号转导通路的影响.同时本研究为国医大师经验方治疗病态窦房结综合征提供了科学依据,也为防治病态窦房结综合征提供了新的诊疗思路.
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