盾壳霉产孢相关基因CMAvaB的克隆及功能的初步研究

来源 :中国植物病理学会2011年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sun_sun
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盾壳霉是植物病原菌核盘菌的重寄生真菌,可以寄生核盘菌的菌丝和菌核。盾壳霉对作物菌核病具有显著的防治作用,目前国际上己有以盾壳霉为有效成分的生防制剂。研究盾壳霉生长发育相关基因及其调控机理,有利于更好指导盾壳霉高效的规模化生产。通过反向-PCR扩增克隆并获得了T-DNA插入可能破坏的基因。T-DNA插入在该基因的启动子区域。分析该基因的氨基酸序列发现其与构巢曲霉的AvaB具有很高的同源性(96%),故命名该基因为CMAvaB。为了进一步明确CMAvaB的功能,通过农杆菌介导转化的方法获得了CMAvaB的敲除转化子与互补转化子。CMAvaB的敲除转化子比突变体ZS-1N22225的生长更加缓慢,生长速度约为出发菌株ZS-1的1/2,产孢量显著下降,仅为ZS-1的0.16。在出发菌株ZS-1中于PDA培养基上,自培养48h到120h中,CMAvaB均有表达,而在T-DNA插入突变体ZS-1N22225中,只有在48h至96h时有少量的表达,在敲除转化子中则完全不表达。进一步研究表明敲除转化子在O.5M山梨醇中的抗逆性显著提高,生长加快,而出发菌株ZS-1的生长受阻。但转化子对O.5M氯化钙与1M氯化钠都很敏感,生长缓慢。表明CMAvaB可能与盾壳霉对高渗和高盐等逆境条件的应答相关。
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