【摘 要】
：
根据本中心测序得到的人PrP基因的序列(AY569456),设计引物,以从人血中提取的基因组DNA为模板PCR扩增出一约440bp的核心片段基因,克隆至原核表达载体pET32a.阳性重组质粒PrP-
【机 构】
：
农业部动物检疫所国家外来动物疫病诊断中心(青岛)
论文部分内容阅读
根据本中心测序得到的人PrP基因的序列(AY569456),设计引物,以从人血中提取的基因组DNA为模板PCR扩增出一约440bp的核心片段基因,克隆至原核表达载体pET32a.阳性重组质粒PrP-pET32a(+)的核苷酸测序结果与参考序列完全一致,转化至大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达并成功的纯化了表达产物.SDS-PAGE电泳显示表达产物分子量约为30KD,大小与预计相符;免疫印迹试验进一步证实,人朊核心病毒片段基因获得了正确表达,具有良好的抗原性.
其他文献
差速离心法纯化H5亚型禽流感病毒,经0.1﹪甲醛灭活后,免疫8周龄Balb/c小鼠,取其脾脏与骨髓病细胞SP2/0融合,以杆状病毒表达的禽流感核蛋白、H5亚型禽流感病毒为包被抗原的间接E
用RT-PCR扩增出禽流感病毒A/chicken/Jiangsu/08/02(H9N2)株核蛋白(NP)基因,首先克隆到pGEM-T easy载体,再亚克隆到转座载体pFastBacl,最后将含有禽流感病毒核蛋白基因的表达
本研究对1株H5N1亚型禽流感病毒(AIV)Chicken/Jilin/9/(H5N1)(JL9/04)进行了全病毒基因组序列测定和分析.结果表明,所扩增到的8个片段均包括相应的病毒基因的完整开放阅读框
将重组质粒pUCm-H5HA、pMD18-H7HA、pMD18-H9HA上的禽流感病毒血凝素H5HA、H7HA、H9HA基因分别插入到核酸疫苗质粒pVAX1中,构建成核酸疫苗表达质粒pVAXH5HA、pVAXH7HA和pVAXH
由于世界各地禽流感的暴发频率越来越高、流行面积越来越广,因而导致全球对它的高度关注,虽然各国对禽流感防止策略不尽相同,但都把禽流感的快速诊断和及时监测作为首要步骤.
本研究选择两株2002年底分离自具有脑坏死特征病死番鸭的禽流感毒株(LS和LH)和两株前期分离自无脑坏死病变的AIV毒株(NJ和SH),进行不同动物的感染试验,以期获得病毒在不同动
禽流感是第一个实行全球性监测的传染病,对人及畜禽的危害非常巨大.每次人类流感的流行,总造成人群中不同程度的超额死亡和带来巨大的经济损失.动物流感,尤其是禽流感与人类
以在E.coli高效表达的犬冠状病毒核蛋白为抗原,用辣根过氧化物酶(HRP)标记的兔抗犬IgG为二抗,建立了检测犬冠状病毒抗体的间接ELISA方法.经方阵滴定确定出最佳反应条件为1μg
文章介绍了基于TITMS32 0F2 4 0DSP的自适应有源噪声控制系统 ,给出了系统的硬件结构及其工作原理 ,详细说明了有源噪声控制的自适应算法 ,并给出了程序流程图及实验结果。通
RNA病毒的反向遗传系统实质上就是利用感染性克隆模拟真实病毒粒子感染宿主,并复制、传代的过程.由于动物RNA病毒的种类繁多(正链、负链、双链、分节段、不分节段),其复制的