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微生物的生合成沉默基因簇在常规实验条件下往往不表达,菌株产生的代谢产物数量远远少于其所具有的代谢潜能,采用激活微生物沉默基因簇的方法,可以充分发掘微生物次级代谢的潜力并可以获得大量新结构天然产物[1]。极地海洋微生物因其特殊极端的生存环境,使其次生代谢产物具有多样的结构和显著的活性,是海洋创新药物的重要来源[2]。我们尝试采用OSMAC策略（one strain many compounds）[3],如改变培养基成分（如添加微量元素、更改碳源和氮源比例、前体化合物或酶抑制剂的添加等）、培养条件（如通氧量、温度、pH等）等培养方法,尽可能激活目标菌所携带的"沉默基因",发掘次级代谢能力,刺激目标菌株尽可能多地产目标特征化合物。菌株Eutypella sp. D-1来源于北极海水样本,课题组前期研究,从菌株的PDB液体培养基培养条件下,分离得到了一系列结构新颖的海松烷型二萜类化合物和细胞松弛素类化合物[4],其中海松烷型二萜类化合物LibertellenoneH,对多种肿瘤细胞具有显著的抑制效果,其IC50值均小于3.0μM,在抗肿瘤药物开发方面具有潜在的价值。为获得更多海松烷型二萜类,采用OSMAC策略,通过更改培养基成分（添加微量元素、更改碳源和氮源比例、加入前体化合物）对该菌株产海松烷型二萜类的发酵条件进行了优化,并且在总结前期获得海松烷型二萜类化合物的HPLC色谱信息、紫外UV光谱信息、分子量和离子碎片等结构信息的基础上,建立了HPLC-PDA-MS分子特征光谱在线检测的方法,实现快速识别活性馏分中的微量海松烷型二萜化合物的目的。目前,从Eutypella sp. D-1发酵物中成功分离得到20个海松烷型二萜类化合物,其中新化合物10个,新骨架化合物1个,测试了所有化合物的抗病毒、细胞毒活性,部分化合物显示了一定的抗病毒活性和较强烈的细胞毒活性。