【摘 要】
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目的 研究热休克蛋白(Hsp)基因在小鼠胚胎后肢正常发育和异常发生过程中的表达情况.方法 ICR小鼠受孕后,将其随机分为实验、对照两组,实验组和对照组各56只.于孕11 d(GD11),经口灌胃一次给予实验组孕鼠80 mg· kg-1的全反式视黄酸、对照组孕鼠给予等体积的大豆油,并分别于GD12～GD18取两组胎鼠的后肢(每窝各取胎鼠1只),利用实时荧光定量PCR检测Hsps基因的表达丰度.共检测
【机 构】
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湖南师范大学医学院预防医学系,湖南长沙410013 第二军医大学卫生毒理学教研室,上海200433
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目的 研究热休克蛋白(Hsp)基因在小鼠胚胎后肢正常发育和异常发生过程中的表达情况.方法 ICR小鼠受孕后,将其随机分为实验、对照两组,实验组和对照组各56只.于孕11 d(GD11),经口灌胃一次给予实验组孕鼠80 mg· kg-1的全反式视黄酸、对照组孕鼠给予等体积的大豆油,并分别于GD12～GD18取两组胎鼠的后肢(每窝各取胎鼠1只),利用实时荧光定量PCR检测Hsps基因的表达丰度.共检测了Hsps基因家族中36个Hsps基因在小鼠胚胎后肢正常发育和异常发生过程中的表达.结果 所有Hsps在小鼠胚胎后肢正常发生和异常表达过程中均表达.在GD12～18,Hsp25,Hspb3,Hsp20,Hspa1a,Hspa8,Hspa,Hspa14,Hspab1,Trap,Hsp105,Grp170,Hspb5,Hspb7和Hspaa1在对照肢和实验肢中的表达模式一致；在GD12～GD18,Hsp25,Hspb3,Hsp20,Hspa1a,Hspa8,Hspa9,Hspa14,Hspab1,Trap,Hsp105和Grp170实验肢表达丰度高于对照肢(P＜0.05)；Hspb5,Hspb7和Hspaa1在GD12 ～ GD17实验肢表达丰度高于对照肢(P＜0.05),而在GD18无差异.在GD12 ～GD17,Hsp27,Hsp40和Hsp65在实验肢的表达丰度高于对照肢(P＜0.05),而出生前低于对照肢(P＜0.05)；于GD12 ～GD15, HO-1和Hspa1b实验肢的表达高于对照肢(P＜0.05),而GD16～GD18则低于对照肢(P＜0.05).于GD12～18,Hsp10,Hspb2,Hsp22,Hspb9,Hspb10,Hsp60,Hspa12a,Hspa1/和Grp78在对照和实验肢的表达模式不同,且在GD12～GD15(或GD16),实验肢中这些基因的表达丰度低于对照肢(P＜0.05),而在以后的发育时间则高于对照肢(P＜0.05).于GD12～18, Hsp47,Hspb4,Apg-1在对照肢和实验肢中的表达模式一致；在GD12～GD15,3个基因在实验肢的表达丰度均低于对照肢(P＜0.05)；在GD16 ～ GD18,Hspb4,Apg-1的丰度高于对照肢(P＜0.05),而Hsp47无差异.于GD12～18,Hspa13,Grp94,Hsp110在对照肢和实验肢中的表达模式一致,且实验肢中这3个基因的表达丰度均低于对照肢(P＜0.05).Hspa12b于GD12～GD14在两组的表达无差异,于GD15实验肢低于对照肢(P＜0.05),于GD16～GD18实验肢高于对照肢(P＜0.05).于GD12～GD18,Hspa2在两组的表达模式一致,且表达丰度无差异.结论 全反式视黄酸所致的小鼠胚胎后肢短肢模型中,Hsp25,Hspb3,Hsp20,Hspa1a,Hspa8,Hspa,Hspa14,Hspab1,Trap,Hsp105,Grp170,Hspb5,Hspb7,Hspaa1,Hsp27,Hsp40,Hsp65,HO-1,Hspa1 b,HO-1,Hspa1b可能起应激反应作用,Hsp10,Hspb2,Hsp22,Hspb9,Hspb10,Hsp60,Hspa12a,Hspa1/,Grp78,Hsp47,Hspb4,Apg-1可能和后肢发育有关,Hspa13,Grp94,Hsp110可能是后肢发育基因.
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