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背景和目的 T细胞免疫应答及其产生的γ-干扰素在抗结核杆菌免疫应答中发挥着关键的作用,基于T细胞对致病结核杆菌特异性抗原(ESAT-6和CFP-10)免疫应答的γ-干扰素释放试验(IGRAs)也已应用于结核病的临床辅助诊断,但是其敏感性尚不理想。通过扩大筛选结核杆菌来源的抗原蛋白(肽)种类,并应用新的研究方法提高结核病的临床诊断特异性和敏感性是值得尝试的策略。本研究应用T细胞释放γ-干扰素试验(T-cell IFN-γresponse assay),测定T细胞对结核杆菌来源的多个抗原的免疫应答强度,并分析正常人群和结核病患者的T细胞免疫应答谱的差异,以获得具有应用前景的结核病临床诊断新指标。方法应用酶联免疫吸附斑点试验(ELISpot)检测15个正常个体和5个活动期肺结核病人T淋巴细胞对结核杆菌来源的六个抗原分子(ESAT-6、CFP-10、Ag85-A、Rv0831c、Rv3619c、Rv2069)的反应强度,并应用细胞因子胞内染色(流式细胞术)对结果进行验证。结果正常人群和结核病患者对六种抗原的T细胞应答呈现不同的反应格局。其中在正常人群中,有86.7%的个体(13/15)的T细胞对BCG和致病结核杆菌共有的Rv3619c分子的反应强度显著高于其它五个抗原,仅有2个正常个体对ESAT-6呈现强反应性,推测其可能为结核杆菌潜伏感染患者;而在活动期结核病患者中,T细胞对致病结核杆菌特异性的ESAT-6(CFP-10)或者Ag85-A分子呈现强反应性,并均显著高于对Rv3619c的反应强度。进一步分析T细胞对ESAT-6(CFP-10)和Rv3619c的反应强度比例(ESAT-6(CFP-10)/Rv3619c),结果显示活动期结核病患者的比值要显著高于正常人群。结论正常人群和活动期结核病患者对Rv3619c和ESAT-6(CFP-10)的T细胞免疫应答强度的显著差异提示人体在BCG接种和致病结核杆菌感染的情况下T细胞对某些特异抗原的应答产生明显的"漂移"。相对于单独采用针对致病结核杆菌特异抗原的T细胞应答作为结核病辅助诊断方法的低灵敏性,T细胞对致病结核杆菌特异性和非特异性抗原的应答强度的比例(如ESAT-6(CFP-10)/Rv3619c)可以作为一种新的潜在指标,应用于结核病的早期临床诊断。