【摘 要】
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猪是乙型脑炎病毒重要的储存和越冬宿主，在人乙型脑炎流行中扮演着重要的作用。在本研究中，利用RT-PCR技术从2009年山西运城某猪场疑似乙型脑炎仔猪脑组织扩增出乙型脑炎病毒prM和E基因，并通过BHK-21细胞传代，分离到一株病毒。间接免疫荧光和RT-PCR进一步证实该病毒为猪源乙型脑炎病毒，并命名为SX09S-01。根据prM基因绘制的进化树表明SX09S-01毒株属于基因I型，E基因与SA-1
【机 构】
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华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,武汉 430070
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会
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猪是乙型脑炎病毒重要的储存和越冬宿主，在人乙型脑炎流行中扮演着重要的作用。在本研究中，利用RT-PCR技术从2009年山西运城某猪场疑似乙型脑炎仔猪脑组织扩增出乙型脑炎病毒prM和E基因，并通过BHK-21细胞传代，分离到一株病毒。间接免疫荧光和RT-PCR进一步证实该病毒为猪源乙型脑炎病毒，并命名为SX09S-01。根据prM基因绘制的进化树表明SX09S-01毒株属于基因I型，E基因与SA-14、SA-14-14-2、P3、HW和XJ69株的核苷酸同源性分别为88[％]、87[％]、88[％]、88[％]和98[％]，其蛋白具有强毒株典型特征。这些结果表明从山西运城新分离的乙型脑炎病毒SX09S-01株属于基因I型猪源乙脑病毒，为进一步研究猪乙型脑炎病毒流行病学和分子生物学奠定基础。
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原核表达PRV gC功能区片段，纯化的重组蛋白His-gCN813制备抗PRV-gC多克隆抗体；PCR克隆PRV gC全长基因，构建gC真核表达质粒，在真核细胞中表达gC基因；制备的抗体分析原核细胞和真核细胞表达的gC蛋白。Westen-blot分析表明抗PRV-gC抗体可以识别大肠杆菌表达的PRVgC蛋白、转染Vero细胞表达的gC蛋白和病毒感染细胞内的gC蛋白。结果说明本试验成功获得了特异性抗
从广西各地猪场采集了猪脑组织、流产的仔猪死胎、种公猪精液、蚊子样品共142份进行检测，结果有34份为JEV阳性。从检测得到的34份阳性样品中选择了1份死胎猪脑组织和1份种公猪精液分别接种BHK-21细胞、乳鼠及鸡胚进行JEV的分离。通过鉴定，证实所分离的两株为乙型脑炎病毒，分别命名为GP株和LC株。应用RT-PCR扩增出GP株和LC株的E基因，并进行了序列测定分析。结果表明，GP株和LC株之间的核
为调查广西猪戊型肝炎(HE)的感染情况，应用套式RT-PCR方法对采自广西9市25个猪场的422份3月龄左右猪只粪样及市售161份猪肝扩增猪戊型肝炎病毒(HEV)ORF2基因特异序列，并进行比对及遗传进化分析。结果:在422份猪粪样中，156份可以检测到HEV RNA，阳性率为37.0[％]；161份猪肝样本中，33份可检测到HEV RNA，阳性率为20.5[％]；25个猪场中检出HEV RNA的
构建双亚型(H3，H1)流感病毒血凝素真核表达质粒，并采用HeLa细胞进行表达。通过PCR分别改造已获得的H1亚型HA1和H3亚型HA基因片段，在融合片段问引入(G4S)3柔性linker和口蹄疫2A蛋白linker。采用DNAstar结合生物信息学软件InsightII分析后对其空间构象进行模拟和评价。将融合表达H1HA1和H3HA的基因片段克降至真核表达载体pVAX1 CMV启动子下游。通过脂
运用PCR重叠延伸技术将传染性法氏囊病病毒(IBDV)多表位5e与VP2基因连接构建组合基因VP2-5e，将其插入到杆状病毒表达系统供体质粒pFastBacHT中，转化E.coli DH10Bac感受态细胞，经三抗性筛选获得重组杆状病毒表达质粒pBactHT-VP2-5e，用脂质体法转染Sf9细胞，获得重组杆状病毒vBacHT-VP2-5e。对vBacHT-VP2-5e感染的Sf9细胞，以间接免疫
目的:制备针对新城疫病毒F48E9株单克隆抗体，以用于NDV抗原变异研究及检测方法建立。方法:用新城疫病毒F48E9株全病毒及原核表达的重组F48E9-NP蛋白免疫BALB/c小鼠，全病毒间接ELISA筛选杂交瘤细胞株。用免疫印迹和间接免疫荧光试验鉴定单抗反应原性，间接ELISA试验鉴定单抗与其他NDV毒株的交叉反应，并采用NP蛋白分段融合表达技术对单抗识别区域初步定位。结果:共筛选到3株单抗杂交
目的:为了解广东省目前规模化猪场H1和H3亚型猪流感病毒的流行情况，方法:我们采用ELISA的检测方法对采集于广东省14个市的28个规模化猪场的1 015份猪血清进行H1亚型和H3亚型猪流感病毒的抗体检测。结果:结果表明，H1亚型抗体总阳性率为40.9[％]，猪场阳性率高达92.9[％](26/28)；H3亚型抗体总阻性率为16.8[％]，猪场阳性率为78.6[％](22/28)。其中粤西和珠三角
对2009年广东省各地采集到的犬脑及对应唾液腺进行检测，分离到2株狂犬病病毒。测定GD01和GD02株N基因核酸序列，并对其核苷酸差异做了比较分析。病毒对相邻广西等地区序列进行比较，相似性相似性在97.9～99.4[％]之间。与疫苗株相似性在87.8～88.1[％]之间。说明狂犬病病毒流行存在明显的地域现象及存在犬只健康带毒现象。
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