【摘 要】
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目的:探讨线粒体损伤及氧化应激在Cr(Ⅵ)诱导Hep3B细胞凋亡的作用,及氧化剂NAC的干预效应.方法:用MTT法检测细胞生存率;用流式细胞仪检测细胞凋亡;用彗星实验检测细胞DNA损伤;用qPCR和Western blot分别检测Cyt-c,Caspase-3和AIF mRNA和蛋白表达水平;用试剂盒检测Caspase-3、ROS和细胞膜电位.结果:Cr(Ⅵ)处理Hep3B细胞可诱导ROS产生增加
【出 处】
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2017年自由基医学与生物学学术交流会议
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目的:探讨线粒体损伤及氧化应激在Cr(Ⅵ)诱导Hep3B细胞凋亡的作用,及氧化剂NAC的干预效应.
方法:用MTT法检测细胞生存率;用流式细胞仪检测细胞凋亡;用彗星实验检测细胞DNA损伤;用qPCR和Western blot分别检测Cyt-c,Caspase-3和AIF mRNA和蛋白表达水平;用试剂盒检测Caspase-3、ROS和细胞膜电位.
结果:Cr(Ⅵ)处理Hep3B细胞可诱导ROS产生增加,导致细胞氧化应激反应,引起线粒体结构和功能改变,造成膜电位崩溃、释放Cyt-c等促凋亡因子,引发caspase级联反应或直接引起DNA断裂,导致细胞凋亡或坏死.caspase抑制剂Z-VAD未能阻抑Cr(Ⅵ)诱导Hep3B细胞凋亡;抗氧化剂NAC预处理对Cr(Ⅵ)诱导的细胞凋亡具有一定的干预作用.
结论:Cr(Ⅵ)能诱导caspase依赖/非依赖的线粒体损伤性细胞凋亡,而其中氧化应激反应是重要的作用机制.
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