【摘 要】
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研究发现自然环境下,相对于其它海水养殖鱼类,黄斑篮子鱼对海水养殖重要病原刺激隐核虫,具有较强的抗病性,其全血清具有很强的抗菌活性,将其全血清分离纯化后,发现其主要
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研究发现自然环境下,相对于其它海水养殖鱼类,黄斑篮子鱼对海水养殖重要病原刺激隐核虫,具有较强的抗病性,其全血清具有很强的抗菌活性,将其全血清分离纯化后,发现其主要杀菌物质是L-氨基酸氧化酶(LAAO)。以此为出发点,通过在NCBI进行鱼类的LAAO同源性比较,设计了两对引物,进行巣式PCR扩增,通过T-A克隆技术,克隆得到黄斑篮子鱼LAAO基因部分片段,约1103bp的基因序列,根据获得的LAAO基因片段,利用RACE反应,得到黄斑篮子鱼LAA0基因全长序列约1753 bp,其中ORF全长为1584 bp,编码527个氨基酸的LAAO前体蛋白,在Genebank 里进行Blast分析结果表明,该序列与平鮋的L-氨基酸氧化酶的相似性最高,相似性达77％,利用所翻译的蛋白序列进行结构分析,发现了28个氨基酸的信号肽序列。黄斑篮子鱼LAAO全长序列的获得为下一步做原核或真核表达垫定了基础,为进一步研究抗菌机理以及实际生产抗菌肽提供了条件。
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