【摘 要】
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目的:探讨低渗联合冻干技术改良制备脱细胞周围神经支架的可行性,检测其理化性能和细胞相容性.方法:采用低渗联合冻干技术改良制备脱细胞神经支架,并进行组织学、扫描电镜、孔隙率及空隙直径测定、生物力学评估,MTT法分析支架浸提液毒性.分离兔脂肪干细胞(ADSCs),采用PKH-26标记,将标记后的ADSCs种植到支架上;用HE染色、荧光显微镜、Live/Dead荧光染色观察细胞在支架上生长、存活情况.结
【机 构】
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天津医科大学总医院骨科生物力学实验室,天津市和平区鞍山道154号,300052;天津市天津医院骨科研究所,天津市河西区解放南路40号,300211
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目的:探讨低渗联合冻干技术改良制备脱细胞周围神经支架的可行性,检测其理化性能和细胞相容性.
方法:采用低渗联合冻干技术改良制备脱细胞神经支架,并进行组织学、扫描电镜、孔隙率及空隙直径测定、生物力学评估,MTT法分析支架浸提液毒性.分离兔脂肪干细胞(ADSCs),采用PKH-26标记,将标记后的ADSCs种植到支架上;用HE染色、荧光显微镜、Live/Dead荧光染色观察细胞在支架上生长、存活情况.
结果:组织学显示支架中无细胞碎片残留,层粘连蛋白、Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原免疫荧光染色阳性.扫描电镜显示支架内髓鞘、轴突等结构均消失,纵切面上可见平行排列的基底膜管,组织结构较为疏松,支架孔隙率为49.3％±9.8％,空隙直径为(17.6±3.7)μm.MTT法显示不同浓度支架浸提液与对照培养液对细胞增殖影响无统计学差异.HE染色、荧光显微镜及Live/Dead染色显示细胞在支架上存活及生长情况良好.
结论:低渗联合冻干技术改良制备的脱细胞神经支架，具有良好的孔隙率及空隙直径，良好的生物力学特性，无毒，细胞相容性良好，可作为一种更有利于细胞复合的神经支架材料。
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