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目的:探讨钴原卟啉(CoPP)诱导大鼠胰岛细胞HO-1高表达后对胰岛细胞的保护作用。
方法:v型胶原酶消化,Ficoll 400梯度离心纯化,分离BN大鼠胰岛细胞。纯化后培养的胰岛细胞双硫腙(DTZ)染色鉴定,苔盼兰染色检测细胞活性。BN大鼠在胰岛细胞分离前3天、1天分别腹腔注射2.5mg/kg的CoPP,免疫荧光及Western blot检测CoPP注射后分离培养的胰岛细胞HO-1的表达。ELISA葡萄糖刺激试验(低糖和高糖)评价CoPP诱导胰岛细胞HO-1表达后对胰岛素释放功能的影响。
结果:每只大鼠平均可获得480±30个胰岛细胞,活性大于90%。细胞免疫荧光及Western blot均证明CoPP可诱导大鼠胰岛细胞表达HO-1.葡萄糖刺激胰岛素释放试验结果显示:在低糖和高糖刺激下,CoPP诱导胰岛细胞HO-1表达后胰岛素分泌量为15.65±0.89mIU/L、46.60±1.13mIU/L,刺激指数为2.98±0.10;正常大鼠胰岛细胞胰岛素分泌量为12.28±O.89mIU/L、19.01±1.49mIU/L,刺激指数为1.55±0.01。两组刺激指数相比较,P<0.05,差异显著,有统计学意义。
结论:CoPP可诱导供体大鼠胰岛细胞HO-1高表达,并能增强体外培养的胰岛细胞的胰岛素释放功能。