建鲤催乳素基因全长cDNA的克隆及序列分析和组织表达

来源 :第十二届全国水产青年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:LZLZ
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  为了解催乳素(Prolactin,PRL)的基因序列以及在建鲤渗透调节组织中的表达情况,采用同源克隆和末端快速扩增(rapid amplication of cDNA ends,RACE)的方法分离克隆了建鲤(Cyprinus carpio var.Jian) PRL基因全长cDNA,得到1028bp的全长cDNA,包括633 bp的开放阅读框(ORF),51bp的5末端非编码区(UTR)以及344bp的3末端非编码区(UTR).对该基因序列和推测的氨基酸序列进行同源性比对和系统分析显示:建鲤与其它硬骨鱼类该基因的氨基酸序列相似度为55.02% ~94.76%,与草鱼(Ctenopharyngodon idella)相似度最高(94.76%),与齐口裂腹鱼(Schizothorax prenanti)、斑马鱼(Danio rerio)相似度稍低,与红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)的相似度较低(55.02%),表明不同物种间的PRL的氨基酸序列具有较高的保守性.用实时定量PCR (RT-PCR)检测该基因在建鲤脑垂体、脑、肠、鳃、性腺、肝、脾、肾中PRL的相对表达量,其中脑垂体最高,其次是肝、鳃、脾、脑、肠、肾,在性腺中也有较低的表达量,表明脑垂体是建鲤PRL基因的主要表达场所,在性腺、肝、脾的表达说明其在鱼体内除了渗透调控可能还存在多种生理功能,为进一步探索建鲤的渗透调控机制提供了有价值的资源和信息.
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