目的：随着水体污染的加剧,微囊藻毒素-LR(Microcystin-LR,MC-LR)潜在的毒性作用及其机制引起了人们的广泛关注。研究发现MC-LR 具有生殖毒性,可以诱导卵巢细胞中内质网应激和自噬的发生,但具体机制尚不明确。内质网应激是近年来研究热点,内质网作为钙离子的主要储存器官,其应激能引起细胞内钙离子增多,从而激活钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶激酶(Calcium/calmodulin-dependent protein kinase kinase 2,CaMKK2)通路。因此,本研究以小鼠卵巢颗粒细胞(KK-1)和C57BL/6 小鼠为模型,探讨CaMKK2 通路在MC-LR 诱导的雌性生殖毒性中的作用。方法：通过腹腔注射对雌性C57BL/6 小鼠进行MC-LR 染毒2 周,或以MC-LR 处理KK-1细胞24h 后,利用蛋白免疫印迹(Western blot)和免疫组化方法检测自噬标志蛋白LC3-Ⅱ、Beclin1 以及CaMKK2 通路相关蛋白的磷酸化水平改变；MDC 染色和免疫荧光方法观察自噬小体和自噬溶酶体形成；H&E 染色观察卵巢组织病理学改变。另外,通过使用siRNA 干扰和CaMKK2 抑制剂STO-609 分别从体内外探讨CaMKK2 在MC-LR 诱导的小鼠卵巢细胞自噬和卵巢损伤中的作用。结果：Western blot 结果显示,MC-LR 染毒后KK-1 细胞和小鼠卵巢组织中自噬标志蛋白LC3-Ⅱ和Beclin1 的表达同对照组相比显著上升；MDC 染色显示KK-1 细胞中自噬小体的荧光强度随MC-LR 染毒剂量上升而上升；免疫荧光显示卵巢组织中LAMP2 和LC3 共定位增加,提示自噬溶酶体形成。同时,免疫组化和Western blot 结果显示,MC-LR 处理后,CaMKK2 和AMPK 的磷酸化水平增加,而mTOR 的磷酸化水平下降,提示CaMKK2 通路的激活。此外,MC-LR 处理还降低了小鼠体重和性腺指数,并诱导小鼠卵巢组织病理学损伤。然而,加入siRNA 和STO-609 处理后,MC-LR 引起的CaMKK2 及下游通路的激活被显著抑制,并且MC-LR 引起的卵巢细胞自噬、卵巢病理学损伤以及小鼠体重降低均有所缓解。结论：综上所述,CaMKK2 通路介导了MC-LR 诱导的小鼠卵巢细胞自噬和卵巢损伤,从而引起雌性生殖系统毒性。