【摘 要】
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目的:利用人工合成的PCR随机引物,对本单位实验动物中心培育的两个近交系大鼠HFJ和MIJ基因组DNA进行扩增,建立HFJ和MIJ大鼠RAPD扩增特征图谱;选择常用近交系大鼠Lewis和F344作
【机 构】
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河北医科大学,河北省实验动物重点实验室,石家庄,050017
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目的:利用人工合成的PCR随机引物,对本单位实验动物中心培育的两个近交系大鼠HFJ和MIJ基因组DNA进行扩增,建立HFJ和MIJ大鼠RAPD扩增特征图谱;选择常用近交系大鼠Lewis和F344作为对照品系,观察HFJ和MIJ大鼠与对照品系大鼠的RAPD多态性。
方法:用传统的酚-氯仿法分别提取4个不同品系大鼠的基因组DNA,从60条随机引物中筛选能够得到清晰扩增条带的30条引物,对HFJ和MIJ大鼠DNA进行扩增。再从30条引物中随机选择12条,对4个品系大鼠基因组DNA扩增,并对扩增条带多态性比较分析。
结果:30条引物,对HFJ和MIJ大鼠DNA进行扩增,均能获得1-6个较清晰条带,除引物O—08外,条带的分子大小均在200—1100bp之间,两品系的引物O—08扩增结果,均在2000bp以上,近原点处,扩增出1条清晰的条带。HFJ和MIJ大鼠品系内个体间和两个品系之间,扩增的结果均完全一致;用12条随机引物对4个品系大鼠同时扩增,HFJ和MIJ大鼠扩增结果一致,与Lewis和F344比较.有5个引物出现差异条带。
结论:用30条随机引物建立了HFJ和MIJ大鼠RAPD扩增特征性图谱。由于两品系共间起源于一对Wistar封闭群大鼠,虽然遗传特性有显著差异,但是在所选30条引物扩增时,未发现多态性。两品系与Lewis和F344之间存在多态性条带。
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