【摘 要】
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目的：流行病学研究揭示了环境中的大气细颗粒物污染与肺癌的发生密切相关.越来越多的研究表明DNA损伤会导致细胞功能障碍和一些与年龄相关疾病的提前发生,其中包括癌症.DNA损伤作为肿瘤的早期事件,研究circRNA调控PM2.5致DNA损伤的分子机制为深入研究其致癌提供了支持.本研究主要通过低浓度PM2.5暴露两种人正常支气管细胞构建PM2.5致DNA损伤的模型,旨在研究circRNA在PM2.5致D
【机 构】
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广州医科大学公共卫生学院,广州,511436
【出 处】
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中国毒理学会表观遗传毒理专业委员会第一次学术大会
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目的：流行病学研究揭示了环境中的大气细颗粒物污染与肺癌的发生密切相关.越来越多的研究表明DNA损伤会导致细胞功能障碍和一些与年龄相关疾病的提前发生,其中包括癌症.DNA损伤作为肿瘤的早期事件,研究circRNA调控PM2.5致DNA损伤的分子机制为深入研究其致癌提供了支持.本研究主要通过低浓度PM2.5暴露两种人正常支气管细胞构建PM2.5致DNA损伤的模型,旨在研究circRNA在PM2.5致DNA损伤的功能.材料与方法：本研究选用在石家庄城市采集的PM2.5样品,首先通过不同浓度的PM2.5暴露16HBE和BEAS-2B细胞,并运用LDH、CCK8实验检测PM2.5对细胞的毒性和细胞活力的影响,碱性彗星实验检测PM2.5导致16HBE和BEAS-2B细胞的DNA损伤；分别通过WB和免疫荧光实验检测γH2AX蛋白的表达；qRT-PCR实验检测circRNA的相对表达,主要通过对circRNA104819进行干扰和过表达并联合PM2.5暴露,研究circRNA104819在PM2.5暴露细胞致DNA损伤的功能.结果：低浓度PM2.5暴露细胞并未引起细胞活力降低和明显的细胞毒性,随着PM2.5浓度的增加,诱导细胞发生DNA损伤水平逐渐加重,并且WB实验结果表明,γH2AX蛋白表达也显著增加,免疫荧光实验结果显示,随着PM2.5浓度的增加,γH2AX蛋白在细胞核中形成的聚焦点数也逐渐增加.qRT-PCR实验结果表明,PM2.5暴露16HBE和BEAS-2B细胞引起circRNA104819相对表达显著升高.干扰circRNA104819并联合PM2.5暴露组相比于单独PM2.5暴露组,DNA损伤水平显著降低,γH2AX蛋白表达也显著减少；而过表达circRNA104819并联合PM2.5暴露的结果与干扰circRNA104819时呈相反的结果.结论：本研究发现随着PM2.5浓度不断增大,DNA损伤水平不断增加,且低浓度的PM2.5即可诱导细胞明显的DNA损伤.同时,PM2.5暴露16HBE细胞和BEAS-2B细胞,引起了circRNA104819的相对表达量增加,circRNA104819在PM2.5致DNA损伤中,具有显著加重DNA损伤的功能.
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