【摘 要】
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将2005年～2006年分离自黑龙江省扎龙自然保护区和哈尔滨周边地区健康野鸟体内的14株新城疫病毒(NDV)，通过鸡胚成纤维细胞(CEF)克隆纯化后，每株病毒选择3～4个病毒克隆用于F基因部分核苷酸片段扩增、PCR产物序列测定，并进行进化分析。根据F基因47～420nt片段构建的分子进化树分析表明，可将其中13/14株野鸟NDV归于基因Ⅶd亚型，具有该型毒株典型的F蛋白裂解位点，属于我国目前流行的
【机 构】
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中国农业科学 院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室/ 禽传染病研究室，黑龙江 哈尔滨 150001
【出 处】
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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会
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将2005年～2006年分离自黑龙江省扎龙自然保护区和哈尔滨周边地区健康野鸟体内的14株新城疫病毒(NDV)，通过鸡胚成纤维细胞(CEF)克隆纯化后，每株病毒选择3～4个病毒克隆用于F基因部分核苷酸片段扩增、PCR产物序列测定，并进行进化分析。根据F基因47～420nt片段构建的分子进化树分析表明，可将其中13/14株野鸟NDV归于基因Ⅶd亚型，具有该型毒株典型的F蛋白裂解位点，属于我国目前流行的优势基因型毒株，与上世纪90年代分离自我国的鸡、水禽、珍禽基因Ⅶd亚型NDV核苷酸序列同源性在93％～97.3％之间。1/14株野鸟NDV属于基因Ⅲ型，与代表毒株Mutkeswar间核苷酸和氨基酸同源性均为100％。健康野鸟携带的Ⅶ亚型和基因Ⅲ型NDV，与目前优势NDV流行毒株和中等毒力疫苗毒株亲源关系相近，表明野鸟与家禽、水禽携带的NDV可以相互传染，对家禽构成巨大潜在威胁，提示加强野鸟NDV的监控及流行病学研究的紧迫性和重要性。
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参考GenBank中发表PRV OSU毒株VP6序列ORF两端保守区，设计1对特异引物，以PRVJS株反转录cDNA为模板，通过PCR方法获得约113kb的基因片段，并克隆到pMD18-T载体中进行序列测定。测序结果表明：获得了vp6的1320bp全基因序列；将其ORF与国内外9株PRV vp6基因的ORF进行核苷酸和氨基酸同源性比较，核苷酸同源性在77.11％～91.11％之间,氨基酸的同源性在
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高致病性禽流感是严重危害养禽业健康发展的烈性传染病。免疫是防治高致病性禽流感的最重要手段之一，并且也取得了很显著的防治效果。但是由于禽流感病毒生存环境的压力不断加快，病毒变异的速度也在加大，防治高致病性禽流感工作面临着极大的挑战。要做好高致病性禽流感的的免疫工作，就必须及时掌握流行毒株情况，并应用针对性的疫苗。近几年我国先后推出了H5N2、H5N1(N28株)的全病毒的灭活苗，H5N1(RE1株)
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