基于氧化石墨烯的毛细管电泳-固定化酶微反应器研究

来源 :第十届全国生物医药色谱及相关技术学术交流会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kc1223
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本工作创新地引入了氧化石墨烯材料作为CE-酶微反应器的酶载体,利用氧化石墨烯材料合成简单、比表面积大、用于酶诱导键合相互作用的表面官能团丰富等特点,借助静电吸附层层自组装方法,制备了毛细管多层酶固定微反应器。以胰蛋白酶固定化酶反应器为例,考察了酶浓度、酶固定化时间、酶固定层数对酶反应器活性的影响。测得的固定化酶的活性和反应速度(Km:0.24+0.02mM,Vmax:0.32+0.04mM/s)与自由酶相符,表明此固定方法不会引起酶结构上的改变以及减少酶的活性。该酶反应器具有极好的稳定性(RSD%<2.8%),且极大地提高了微反应器上酶的负载量,对BSA蛋白质的在线水解反应(孵化时间仅30分钟)与离线水解反应(孵化时间长达12小时)的质谱表征结果一致,表明该方法在蛋白质分析中具有很好的应用前景。
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