花生功能性短肽的制备、纯化及构效关系研究

来源 :2013全球华人保健(功能)食品科技大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hz198119
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  [目的]拓展脱脂花生粕的利用途径,提高花生制品的附加值,为开发花生短肽保健产品奠定基础.[方法]采用Alcalase与N120P复合酶解花生分离蛋白制备花生短肽,采用GFC与制备型RP-HPLC分离纯化各个组分,利用MALDITOF/TOF质谱分析氨基酸序列,采用Discovery Studio分子模拟软件对其构效关系进行探讨.[结果]酶解产物中小于1kD的花生短肽组分PP-Ⅱ,其ACE抑制活性(IC50)为0.091 mg/mL;进一步分离纯化得到了27个组分,其中组分P8具有最高的ACE抑制活性,IC50值为0.0052 mg/mL(6.42 μmol/L);经质谱分析,其相对分子质量为808.8,氨基酸序列为KLYMRP;经固相化学合成P8,其IC50值为0.0038 mg/mL(4.69μmol/L);经分子模拟,P8与ACE的Glu、Arg和Ser残基形成氢键,且Zn与P8的两个羧基氧形成配位,得到了P8-ACE复合物.[讨论]利用酶解技术能够得到具有高活性的花生ACE抑制肽;P8的C末端为Pro,N末端为碱性氨基酸Lys,且肽的疏水性很强,与文献报道一致;固相化学合成出的P8也具有高ACE活性,进一步说明其具有ACE抑制结构;而P8与ACE之间的各种非共价键能够阻碍ACE活性的发挥,达到抑制目的.
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