【摘 要】
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目的：布鲁氏菌属人畜共患病病原体,是潜在的致残性生物恐怖战剂,我国将其列为法定2类传染病.许多商品化细菌鉴定系统常常将布鲁氏菌误鉴定为其它革兰阴性杆菌.本研究旨在
【机 构】
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沈阳军区总医院检验科,辽宁 沈阳 110840
【出 处】
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第四届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学论坛
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目的：布鲁氏菌属人畜共患病病原体,是潜在的致残性生物恐怖战剂,我国将其列为法定2类传染病.许多商品化细菌鉴定系统常常将布鲁氏菌误鉴定为其它革兰阴性杆菌.本研究旨在探讨建立准确,快速地鉴定布鲁氏杆菌菌种及生物型的PCR-HRM(高溶解曲线分析法)方法.材料方法：中国疾病预防与控制中心布病研究实验室提供的布鲁氏菌属6个种15个生物型,即羊种(生物型1,3),牛种(生物型1～7,9).猪种(生物型1,3)及绵羊型副睾种,沙林鼠种,犬种(各1个生物型).根据不同种间特定基因差异,合成共7对基因扩增引物,用于属内菌种间鉴别,1对用于布鲁氏菌属基因扩增,用于布鲁氏菌属特异基因鉴定.近3年来临床分离并送疾控中心鉴定的马耳他布鲁菌35株,临床分离的其它常见革兰阴性杆菌及革兰阳性球菌20种作为特异性实验对照菌株.采用罗氏LightCycler(冈)480 PCR扩增仪及配套Gene Scanning Software version 1.5 HRM分析软件分析结果,实验使用饱和荧光染料LC Green Plus来保证分析结果精确.结果：属特异引物在所有经证实的布鲁菌菌株中菌扩增出特异性DNA溶解曲线,其它对照菌株阴性.使用其中6对引物可使6个种15个生物型标准菌株产生能够相互区别的标准DNA溶解曲线,以为标准,可以将临床分离的35株马耳他布鲁菌菌株准确鉴定到种.结论：该法有可能作为临床分离布鲁氏菌的快速菌种鉴定方法,值得进一步研究.
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