变形链球菌密度感应CSP信号肽的固相合成和鉴定

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目的:人工合成变形链球菌密度感也CSP信号肽及鉴定。方法:应用固相多肽合成仪采用Fmoc/PyBOP合成法合成变形链球菌Streptococcus mutans UA159 comC基因编码的26-46位氨基酸序列NH2 SGSLSTFFRLFNRSFTQALGK COOH,通过高效液相色谱仪采用C18反相柱子进行合成多肽纯化,质谱分析技术对合成产物进行检测,通过检索SWISS-PROT蛋白质数据库对多肽的氨基酸组成及功能初步分析。结果:准确合成了21个氨基酸的CSP蛋白多肽序列,实际分子量为2364.7,纯度达90%以上;通过SWISS-PROT蛋白质数据库中的ExPASy序列分析系统对合成序列进行分析,分子式为C108H166N30O30、预期分子量为 2364.69,理论pI值为12.01;进一步的SignalP 3.0 Server分析显示该合成的蛋白多肽为非分泌性信号肽;合成多肽序列的质谱分析结果与蛋白质数据库检索信息相符。结论:成功合成变形链球菌CSP信号肽,为变形链球菌密度感应作用机制研究奠定基础。
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