【摘 要】
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目的 探讨多种化学致敏物作用于THP-1源性巨噬细胞后,细胞上清液中细胞因子表达的变化,为确定化学物是否具有致敏性提供更有效的参考指标,从而减少职业人群中化学致敏物的接触,有效的预防过敏性疾病的发生.方法 首先将人单核细胞株THP-1细胞用佛波酯(PMA,0.1 mg·L-1)诱导72 h,使之转化为具有贴壁能力的THP-1巨噬细胞.选择硫酸镍(NiSO4)、2,4-二硝基氯代苯(DNCB)、苯二
【机 构】
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中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所化学污染与健康安全重点实验室,北京100050 河北联合大
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目的 探讨多种化学致敏物作用于THP-1源性巨噬细胞后,细胞上清液中细胞因子表达的变化,为确定化学物是否具有致敏性提供更有效的参考指标,从而减少职业人群中化学致敏物的接触,有效的预防过敏性疾病的发生.方法 首先将人单核细胞株THP-1细胞用佛波酯(PMA,0.1 mg·L-1)诱导72 h,使之转化为具有贴壁能力的THP-1巨噬细胞.选择硫酸镍(NiSO4)、2,4-二硝基氯代苯(DNCB)、苯二胺(PPDA)、重铬酸钾(K2Cr2O4)、甲苯二异氰酸酯(TDI)5种化学致敏物和十二烷基磺酸钠(SDS)、异丙醇(IPA)2种非化学致敏物为受试物,检测不同浓度受试物处理细胞的不同时间点时细胞因子表达的变化.分别用ELISA法检测细胞培养上清中IL-6和TNF-α的水平,用流式液相多重蛋白定量技术(CBA)检测IL-1β和IL-8细胞因子的表达水平.结果 5种化学致敏物均能引起IL-6,TNF-α,IL-1β,IL-8的表达升高,不同的致敏物诱导细胞分泌细胞因子表达的时间并不相同,NiSO4,DNCB,K2Cr2O4作用6h,PPDA,TDI作用12h时,THP-1细胞上清中IL-6,TNF-α,IL-1β,IL-8四种细胞因子的表达量最高.NiSO4,DNCB和TDI组细胞上清中IL-1β,TNF-α和IL-8表达量增加并呈剂量反应关系.K2Cr2O4,PPDA组IL6,IL-8表达升高且有剂量反应关系.5种化学致敏物NiSO4,DNCB,K2Cr2O4,PPDA,TDI在最适时间点最适浓度刺激细胞分泌IL-6的水平分别为对照组的40,25,20,50和50倍,TNF-α水平为对照组的20,12,20,8和5倍,IL-1β水平为对照组的30,60, 25,30和45倍,IL-8水平为对照组的15,12,15,12和7倍；非致敏物SDS与IPA处理组IL-6水平均有升高,其中SDS组升高最明显,且呈明显的剂量反应关系,SDS高剂量组(1 mg·L-1)IL-6含量约为空白对照组的30倍左右,因此提示IL-6指标不能作为评价致敏物的有效指标.TNF-α,IL-1β和IL-8表达水平无明显变化,因此TNF-α,IL-1β和IL-8这三个指标可作为评价化学物致敏性的有效标记.结论 THP-1巨噬细胞分泌细胞因子TNF-α,IL-1β,IL-8受化学致敏物的影响,但不受非致敏物的影响.因此这3个指标可作为鉴别化学致敏物和非致敏物的有效参考指标.
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