整合报告基因和转座突变筛选达托霉素生物合成调控基因

来源 :第十三届全国抗生素学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yinzhg01
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达托霉素已成为治疗革兰氏阳性菌感染的重要药物.达托霉素的生物合成途径无典型的途径特异性调控基因,暗示其合成调控可能具有独特的机理.筛选和鉴定达托霉素生物合成的调控基因,对于丰富链霉菌次级代谢调控有重要意义,也将为提高提高达托霉素产量提供重要的候选靶点.本研究以葡萄糖甘酸酶基因gUSA和卡那霉素抗性基因neo作为报告基因,将其与目标基因的启动子结合,同时联合转座突变来筛选基因簇转录水平和达托霉素产量发生变化的突变株。质粒pHL734属于下np(5)转座系统,其转座效率较高,插入位点单一,可通过简单测序找到插入位置。本研究以达托霉素产生菌玫瑰抱链霉菌为出发菌株,用pHL734进行转座突变,得到了3000多株突变株,效率达到了 10-7左右。报告基因结合转座子诱变技术获得了数个调控达托霉素的新型调控基因,详细的调控机制正在研究当中。
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