目的:通过研究SPLUNC1基因对鼻咽癌细胞系5-8F和6-10B受细菌脂多糖LPS刺激时细胞TLR4及其下游通路的影响,确定SPLUNC1、炎症与鼻咽癌发生发展的关系。方法:首先应用RT-PCR检测鼻咽癌细胞系中TLR4的表达水平。随后MTT检测LPS对鼻咽癌细胞株5-8F和6-10B增殖的影响。接着将SPLUNC1克隆入pCMV-GFP哺乳动物表达载体,稳定转染鼻咽癌5-8F和6-10B细胞株后,应用免疫荧光、荧光素酶报告系统检测在LPS刺激下SPLUNC1对NF-κB活性的影响;ELISA法检测在LPS刺激下SPLUNC 1对炎性细胞因子IL-6、IL-8、GM-CSF分泌的影响;蛋白质印迹检测在LPS刺激下SPLUNC1对TLR4及其下游分子myd88、TRAF6和p-AKT表达的影响。结果:RT-PCR检测显示,在所有鼻咽癌细胞系中5-8F和6-10B细胞系表达TLR4较多;MTT结果显示1ug/ml浓度的LPS能够促进5-8F和6-10B细胞的增殖。免疫荧光等结果显示与空白载体组相比,SPLUNC1组在LPS的刺激下NK-κB(P65)入核率降低,炎性细胞因子IL-6、IL-8、GM-CSF的分泌下降,TLR4及其下游分子myd88、TRAF6和p-AKT的蛋白表达量均下降。结论:在鼻咽癌细胞系5-8F和6-10B中,SPLUNC1能明显抑制在LPS诱导下TLR4及其下游分子和炎性细胞因子的表达,提示SPLUNC1的抗炎作用可能是其抗鼻咽癌发生发展的机制之一。