结扎结合弹力酶诱导法制作兔动脉瘤模型及相关分析

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目的探讨结扎结合弹力酶诱导(简称结扎法)制作兔动脉瘤动物模型的新方法,并比较其相对于外科缝合制作动脉瘤模型方法的优越性;探索该动脉瘤的行为特性;分析其血流动力学、组织学特征;探讨该动脉瘤模型的应用价值。材料和方法取成年健康新西兰大白兔16只作为实验对象。雌雄不限,体重3.0-3.5kg。DSA检查用西门子数字减影血管造影机、4F股动脉穿刺套和造影导管。分别用结扎法和外科缝合法制作出两种兔动脉瘤模型。结扎法制作方法:全麻暴露游离右侧颈总动脉,用动脉夹夹闭右颈总动脉起始端,用丝线在合适位置结扎右侧颈总动脉远端。在颈总动脉远端结扎点前端剪断右侧颈总动脉,形成一颈总动脉残端。注射器抽取弹力酶溶液注入右侧颈总动脉残端,并孵化约20分钟。完毕,用丝线距右侧颈总动脉开口约7-10mm处结扎该动脉段,松开动脉夹,可见一随动脉血搏动的“动脉桩”,此即用结扎法所制作出来的“动脉瘤”。外科缝合法制作方法:全麻暴露游离双侧颈总动脉,从左侧颈总动脉截取一小动脉段浸泡于弹力酶溶液中约20分钟后,在显微镜下将该小动脉段缝合至右侧颈总动脉侧壁,此小动脉段即为用外科缝合法制作出来的“动脉瘤”。动脉瘤模型造影:动脉瘤模型制作后一周和一个月,分别行第一和二次动脉瘤模型造影检查。外科切开实验动物右侧股部,显露右侧股动脉,游离股动脉后,用4F穿刺针穿刺股动脉,经导丝引入动脉鞘,建立股动脉通道。在透视下从动脉鞘送入4F椎动脉导管至主动脉弓或头臂干,经导管用注射器推注1ml泛影葡胺进行手推减影,行动脉瘤模型造影检查。病理检查:实验组兔子行经股动脉造影后,取3只行静脉内推注过量麻醉药处死。将动脉瘤连同载瘤动脉切取,置于10 %的甲醛溶液中固定。48小时后,用0 . 01M PBS溶液冲洗3次,每次5分钟,再置于中性甲醛溶液中固定一周。然后进行乙醇梯度脱水,包埋、修块、半薄切片,Verhoeffs Van Giesen solution–stained(弹力纤维染色)染色后光镜下观察病理变化。结果用结扎法制作动脉瘤模型10个,术后见制作的动脉瘤充盈良好,可见动脉瘤明显的搏动。用外科缝合法制作动脉瘤模型6个,术后见制作动脉瘤充盈良好,可见动脉瘤明显的搏动。第一次造影检查显示:兔血管造影显示动脉瘤呈囊状。10个用结扎法制作的动脉瘤模型全部通畅,测量动脉瘤长度平均值为6.53±0.65 mm,宽度平均为3.7±0.16mm。用外科缝合法制作动脉瘤模型6个,造影仅见2个动脉瘤显影,通畅率33.3%。其余动脉瘤均闭塞。第二次血管造影检查显示:用结扎法制作动脉瘤呈囊状。动脉瘤长度平均值为:9.02±0.52mm,宽度平均值为:5.06±0.31mm。2个用外科缝合法制作通畅的动脉瘤均闭塞。病理结果显示:Verhoeffs Van Giesen solution–stained染色显示,动脉瘤模型动脉壁内弹力层和中弹力层基本缺失,而正常动脉壁内弹力层和中弹力层完整。结论用结扎法制做出的动脉瘤模型通畅率高,具有自发生长的特征;其在形态学、组织学和血流动力学和人类颅内动脉瘤模型类似;该方法操作简单、效果确实,具有很好的应用价值。
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