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增生性瘢痕(hypertrophic-scar,HS)是创伤后,尤其是深度烧伤后最常见的一种病理性愈合现象。其本质是成纤维细胞(fibroblast,FB)的异常增殖和细胞外基质的过度沉积。在当今,尽管对增生性瘫痕的发病机制和治疗手段进行了大量的研究,但目前仍没有理想的结果。因此寻求有效防治增生性瘢痕的方法是创伤修复领域的重要课题。经研究表明,水蛭素具有抑制器官纤维化、抗炎等作用。本实验对体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞(hypertrophic scar fibroblast ,HSFb)进行了以下实验内容,深入研究了水蛭素对HSFb的抑制作用,探讨水蛭素对HS的作用方式和机制,为临床治疗HS提供理论依据。目的研究水蛭素诱导体外培养的人增生性瘢痕成纤维细胞凋亡的作用及相关机制。方法分离培养HSFb,取4-7代细胞,实验组水蛭素浓度为1u/ mL、0.5 u/ mL、0.25 u/ mL、0.125 u/ mL,对照组选择完全培养基处理,观察药物对细胞的影响。检测指标:1倒置相差显微镜观察细胞形态变化;2 MTT法检测细胞活力及细胞计数;3免疫细胞化学染色检测HSFb中bax和bcl-2的表达;4Western blot法检测bax和bcl-2的蛋白表达。结果1 MTT比色结果显示水蛭素作用于HSFb的增殖呈现出明显的抑制趋势,且和药物浓度呈相关性。2水蛭素处理后细胞凋亡率增加,和对照组相比有统计学差异。3免疫组化实验图形分析软件分析结果表明,和对照组相比,水蛭素干预组bax表达增加,bcl-2表达下降。4Western blot法检测和对照组相比,水蛭素干预组bax表达增加,bcl-2表达下降。结论本实验通过对体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞不同指标的检测,证实水蛭素对人增生性瘢痕成纤维细胞有显著的抑制作用,其抑制作用可能与以下几个方面有关:1水蛭素可改变细胞形态;2水蛭素抑制人增生性瘢痕成纤维细胞增殖;3水蛭素增加人增生性瘢痕成纤维细胞中bax的表达;4水蛭素抑制人增生性瘢痕成纤维细胞中bcl-2的表达。