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目的：前期实验中，我们通过SEREX血清学筛选得到大鼠睾丸特异性表达的新基因AY845219，为了更方便的研究基因的功能，我们应用生物信息学的同源性分析和RT-PCR技术克隆得到小鼠的同源新基因Biot2，利用生物信息学的多种软件对其核酸和蛋白质的结构和其他一般特性以及生物学功能进行预测，结合预测结果进行大量实验对基因的组织表达谱、亚细胞定位、组织内定位等基本特性进行检测，并进一步应用RNAi技术、细胞转染技术及建立小鼠肿瘤模型进行成瘤性实验、治疗性试验等初步探讨其生物学功能。方法：采取生物信息学分析与RT-PCR技术相结合的方法克隆得到新基因Biot2全长cDNA序列；结合多种生物信息学软件和工具对Biot2基因及编码蛋白的性质和功能进行初步分析和预测；用RT-PCR技术检测该新基因在小鼠正常组织中和肿瘤细胞株中的表达谱；利用半定量RT-PCR、Realtime RT-PCR及原位杂交的方法检测Biot2基因在睾丸组织内定位和在睾丸发育、生精过程中的动态表达情况；构建Biot2的GFP融和蛋白转染HEK293细胞检测Biot2基因亚细胞定位。为进一步研究该基因对细胞生长的影响，我们构建Biot2-pcDNA3.1(+)重组真核表达载体，同时合成Biot2基因特异的干扰质粒，转染NIH3T3细胞和小鼠肿瘤细胞，分别观察在Biot2基因过表达和表达下调时，正常细胞和肿瘤细胞的生长特性的变化。另一方面，为了进一步验证体外实验结果，我们又建立小鼠结肠癌肿瘤模型，采用尾静脉注射干扰质粒的方法进行治疗实验，观察肿瘤组织生长情况的改变；同时将又将干扰质粒瞬时转染的结肠癌肿瘤细胞接种小鼠，观测成瘤性的变化。结果：得到小鼠新基因Biot2全长cDNA序列；该基因特异表达于睾丸组织，尤其大量表达于成熟精子头部，随睾丸发育和生精过程呈规律性表达；Biot2基因还表达于多种鼠源肿瘤细胞株，特别是上皮细胞来源的癌细胞株；通过生物信息学分析和GFP融和蛋白技术发现其定位于细胞浆；当Biot2基因下调时，在体外明显抑制肿瘤细胞和正常细胞生长速度(P<0.05)，体内成瘤实验中，荷瘤小鼠起瘤时间明显延长、肿瘤组织生长速度明显减慢(P<0.05)；治疗实验中干扰质粒治疗组小鼠较对照组肿瘤组织生长速度显著下降(P<0.05)，实验结束时肿瘤组织体积明显小于对照组(P<0.05)。结论：本研究获得小鼠新基因Biot2的全长cDNA序列，初步检测了基因的组织分布和表达谱，探索了基因与睾丸发育和肿瘤发生的关系，为进一步研究该基因的生理功能及作用机制奠定初步基础。