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目的卵巢癌是全球妇科肿瘤中死亡率最高的恶性肿瘤。浆液性卵巢癌为上皮性卵巢癌最常见的类型。其发病机制仍未明确。流行病学及遗传学分析发现卵巢癌的发生与基因的突变有关,同时还伴随着PI3K/AKT/mTOR、RAS/RAF/MEK等通路的变化。近年来,神经酰胺合成酶家族(Ceramide Synthases)在肿瘤领域的研究越来越受到关注。神经酰胺合成酶6(Ceramide Synthase 6,CerS6)主要合成C16:0-神经酰胺并参与了多种肿瘤的发生和进展。我们通过数据库分析发现CerS6在浆液性卵巢癌组织中明显高表达,且CerS6的表达量与浆液性卵巢癌预后呈负相关。本文旨在研究CerS6在卵巢组织中的表达情况及其在浆液性卵巢癌细胞中的功能并对其相应的作用机制进行初步探究。方法1、利用数据库分析及免疫组化法检测CerS6在浆液性卵巢癌组织中的表达以及高表达CerS6与临床病理特征之间的关系,以评估CerS6的临床意义;2、在体内外层面利用CCK-8、克隆形成、裸鼠异体皮下移植瘤实验、Transwell试验、划痕试验、流式细胞实验和Western Blot等实验检测CerS6对浆液性卵巢癌细胞增殖、侵袭、迁移、细胞凋亡和细胞周期的的影响;3、利用Gene Set Enrichment Analysis(GSEA)和R(R语言)进行富集分析,利用高通量转录组测序(RNA-seq)比较了特异性干扰CerS6前后浆液性卵巢癌OVCAR8的转录组变化,并将差异表达的基因进行Gene Ontology(GO)分析和Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)富集分析;4、利用Western Blot法比较了干扰CerS6前后浆液性卵巢癌OVCAR3和OVCAR8细胞的AKT/mTOR/4EBP1信号通路中的相关分子活化情况。结果1、数据库分析结果显示CerS6在上皮性卵巢癌中表达明显高于良性卵巢组织,并且CerS6的表达与卵巢癌的预后呈负相关。免疫组化结果显示CerS6在浆液性卵巢癌中高表达,且与浆液性卵巢癌的病理分级和临床分期密切相关。2、干扰CerS6后,明显抑制了浆液性卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并促进了细胞的凋亡能力,裸鼠体内皮下成瘤实验显示干扰CerS6后,显著抑制了裸鼠皮下瘤的大小及生长;而过表达CerS6后,显著促进了浆液性卵巢癌细胞的增殖和迁移能力;3、GSEA分析和R语言分析结果显示在干扰CerS6后差异基因与DNA复制过程及细胞周期最相关,高通量转录组测序结果显示,特异性干扰CerS6后可以显著影响浆液性卵巢癌的细胞周期;干扰CerS6后的浆液性卵巢癌OVCAR3和OVCAR8细胞G2/M期的细胞比例增加,而对G1期无明显影响,并且发现细胞周期G2/M期相关蛋白(CDK1和CCNB1)的表达量显著减少;4、Western Blot结果显示干扰CerS6后,p-AKT、p-mTOR、p-4EBP1的表达量显著减少,而AKT、mTOR、4EBP1的表达量无明显变化。结论1、CerS6在上皮性卵巢癌组织中高表达,并且CerS6的高表达与浆液性卵巢癌的病理等级与临床分期密切相关,因此,CerS6有望成为浆液性卵巢癌一个新的预后标志物;2、干扰CerS6能抑制浆液性卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭、促进其凋亡并且影响细胞周期G2/M期;3、CerS6可能通过激活AKT/mTOR/4EBP1通路促进卵巢癌细胞发挥增殖,侵袭转移等功能。CerS6有望成为浆液性卵巢癌新的治疗靶点。