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目的:探讨烟酸姜黄素酯(Curcumin Nicotinate,CN)对低剪切应力(Low Shear Stress,LSS)诱导人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVECs)凋亡的抑制作用及机制研究。方法:首先采用CCK-8法检测不同浓度CN处理HUVECs细胞24h对HUVECs细胞活性的影响。然后运用平行平板流动腔装置建立LSS诱导HUVECs凋亡模型。采用Hoechst 33258荧光染色、流式细胞术检测CN对LSS诱导HUVECs凋亡的影响。实时荧光定量PCR检测CN对LSS诱导HUVECs中miR-224表达的影响;Western blot检测CN对LSS诱导HUVECs中前蛋白转化酶枯草溶菌素9(Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9)蛋白表达的影响及 miR-224-5P 对 PCSK9蛋白表的影响。运用RNAi技术向HUVECs中转染PCSK9siRNA后再用Western blot 检测 PCSK9siRNA 对 Bcl-2、Bax 和 Caspase-3 蛋白表达的影响。结果:CCK-8法结果表明:与对照组比,2.5umol/L的CN对HUVECs细胞活性没有影响(P>0.05);5umol/L、10umol/L、20umol/L 的 CN 能够促进HUVECs细胞活性(P<0.05);40umol/L CN抑制HUVECs细胞活性(P<0.05);Hoechst 33258荧光染色结果显示:与静态培养组比,LSS组(3dyne/cm2,12h)内呈现凋亡形态的HUVECs明显增多。与LSS组比,CN+LSS组内呈凋亡形态的HUVECs明显减少,其中以20umol/L CN+LSS组内呈现凋亡形态的HUVECs数量最少。流式细胞术结果显示,与静态培养组比,LSS组HUVECs凋亡率明显增加,差异有显著统计学意义(P<0.01);与LSS组比,CN组呈剂量依赖性减少HUVECs的凋亡率,差异具有统计学意义(P<0.01)。其中以20umol/L CN+LSS组HUVECs凋亡率减少最为明显,差异具有显著统计学意义(P<0.01)。实时荧光定量PCR结果显示:与静态培养组比,LSS组miR-224表达水平明显下调,差异有统计学意义(P<0.01);与LSS组比,CN+LSS组miR-224表达水平逐渐上调,并且呈现浓度依赖性,差异有统计学意义(P<0.05)。其中以20umol/L CN+LSS组miR-224表达水平上调最明显,差异具有显著统计学意义(P<0.01)。Western blot结果显示:与静态培养组比,LSS组内PCSK9蛋白表达显著升高,差异具有统计学意义(P<0.01);与LSS组比,CN+LSS组内PCSK9蛋白表达下降,并且呈现浓度依赖性,差异具有统计学意义(P<0.05)。其中以20umol/LCN+LSS组PCSK9蛋白表达下降最为明显(P<0.01)。转染miR-224-5P mimic,Western blot结果显示,与LSS组比,miR-224-5Pmimic明显抑制LSS上调的PCSK9表达,差异具有统计学意义(P<0.01)。利用RNAi技术沉默PCSK9在HUVECs中的表达,结果显示浓度为100nM的PCSK9siRNA沉默HUVECs中PCSK9表达效果最佳(P<0.01)。Western blot结果显示,与空白对照组比,LSS组Bax、Caspase-3蛋白表达上升,Bcl-2蛋白表达下降,差异具有统计学意义(P<0.01);与 LSS 组比,PCSK9siRNA 组 Bax、Caspase-3蛋白表达下降,Bcl-2蛋白表达升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:1.5umol/L、10umol/L、20umol/LCN 促进 HUVECs 细胞活性,40umol/L CN对HUVECs细胞活性具有抑制作用。2.CN对LSS诱导的HUVECs凋亡具有抑制作用,作用机制可能与CN上调miR-224表达、下调PCSK9表达相关。3.miR-224-5P 能够抑制 HUVECs 中 PCSK9 表达。4.PCSK9siRNA 能够抑制 LSS 诱导的 HUVECs 中 Bax、Caspase-3 蛋白表达,上调Bcl-2蛋白表达。