马铃薯晚疫病菌对甲霜灵抗性治理对策研究

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植物病原菌抗药性是植物病害化学防治中的突出问题。甲霜灵是目前防治马铃薯晚疫病中应用最为普遍的杀菌剂。本文通过检测马铃薯晚疫病菌对包括甲霜灵在内的6种内吸性杀菌剂的抗性;筛选防治晚疫病高效、与甲霜灵之间无交抗关系及抗药性风险较低的药剂;筛选对抗甲霜灵菌株增效的药剂组合;研究药剂交替使用后对晚疫病菌对甲霜灵抗性发展的影响,制订了马铃薯晚疫病菌对甲霜灵抗性治理的用药策略。主要研究结果如下:1.对薯片夹叶分离法进行了改进,使分离成功率升至100%。测定了马铃薯晚疫病菌在RSA①、RSA②和CA三种培养基上的菌落扩展和产孢能力显示,晚疫病菌在RSA①和CA上生长较快,RSA②次之;产孢量依次为RSA①>CA>RSA②,RSA①较适合马铃薯晚疫病菌的培养。晚疫病菌在CA上的菌落扩展速度与在RSA①上相当,且CA原料易得、制作简便,可用于测定药剂对晚疫病菌菌丝生长的抑制作用及离体条件下检测马铃薯晚疫病菌对杀菌剂敏感性。2.采用菌丝生长速率法(在含区分剂量药剂的CA平板上)和叶盘漂浮法分别检测了2007~2009年采自我国北方五省的马铃薯晚疫病菌对甲霜灵的抗性(分别为380个菌株和227个菌株),发现抗性频率分别为80%和74%,表明上述地区晚疫病菌对甲霜灵已普遍产生了抗性。3.采用叶盘漂浮法检测2007~2009年采自我国北方五省的马铃薯晚疫病菌对精甲霜灵、霜脲氰、烯酰吗啉、氟吗啉和嘧菌酯的敏感性,并建立了晚疫病菌对霜脲氰、烯酰吗啉、氟吗啉和嘧菌酯的敏感基线,结果显示:(1)精甲霜灵对96株晚疫病菌的EC50值为0.002 9~395.867 5μg/mL,其中抗性菌株占54.2%,中间型菌株占44.8%,敏感菌株仅占1.0%。(2)晚疫病菌对霜脲氰的敏感基线为(0.673 6±0.090 2)μg/mL,110株晚疫病菌中70%的菌株已对霜脲氰产生了抗药性,其中高抗菌株占1.8%,抗性水平最高达1 024倍。(3)晚疫病菌对烯酰吗啉、氟吗啉和嘧菌酯的敏感基线分别为(0.215 5±0.011 9)μg/mL、(0.337 4±0.019 9)μg/mL和(0.218 8±0.011 1)μg/mL,并且敏感菌株占优势,频率分别为92.2%、93.7%和88.4%,仅有少量低抗菌株存在,未检测到中抗及高抗菌株。(4)田间存在对甲霜灵和霜脲氰的双抗菌株(MRCRDSAS型)、对甲霜灵和嘧菌酯的双抗菌株(MRCSDSAR型)及对甲霜灵、霜脲氰和嘧菌酯的三抗菌株(MRCRDSAR型)频率分别为78.0%、1.1%和3.3%。4.采用叶盘法测定了19种杀菌剂对抗甲霜灵菌株的毒力,结果表明嘧菌酯?苯醚甲环唑、嘧菌酯、烯酰吗啉、双炔酰菌胺、吡唑醚菌酯、吡唑醚菌酯?代森联和唑胺菌酯有较强的抑制作用,其EC90值均小于10μg a.i/mL,其次为氟菌?霜霉威、嘧菌酯?百菌清、烯酰?锰锌、噁唑菌酮?锰锌、代森锰锌、霜脲?锰锌、噁唑菌酮?霜脲氰、百菌清和氢氧化铜,其EC90值在10~100μg a.i/mL之间,氟啶胺、霜霉威和丙森锌的相对防效较差,其EC90值均大于100μg a.i/mL。5.在河北围场县克勒沟镇围字村进行的田间药效试验结果表明,氟菌?霜霉威和双炔酰菌胺对马铃薯晚疫病具有良好的防效(88.9%和82.7%),显著高于霜脲?锰锌、烯酰吗啉、嘧菌酯、代森锰锌和百菌清的防效;在河北崇礼县狮子沟原种场进行的田间药效试验结果表明,氟菌?霜霉威对马铃薯晚疫病具有较好的防效(93.8%),其次为霜脲?锰锌和烯酰吗啉(84.7%和80.2%),且显著高于代森锰锌、嘧菌酯和百菌清的防效。6.初步评估了马铃薯晚疫病菌对双炔酰菌胺和唑胺菌酯的抗药性风险:(1)早期田间抗性检测结果显示,232株晚疫病菌中对双炔酰菌胺敏感的菌株占94.4%,低抗菌株占5.6%,未检测到中抗及高抗菌株;双炔酰菌胺与甲霜灵、霜脲氰和嘧菌酯之间不存在交互抗药性关系,但与烯酰吗啉和氟吗啉之间存在交互抗药性关系;田间抗双炔酰菌胺菌株的抗药性不能稳定遗传,且其适合度指数显著低于敏感菌株,表明晚疫病菌对双炔酰菌胺具有较低的抗性风险。(2)早期田间抗性检测结果表明,127株晚疫病菌中对唑胺菌酯敏感的菌株占91.3%,低抗菌株占8.7%,未检测到中抗及高抗菌株;唑胺菌酯与甲霜灵、霜脲氰和烯酰吗啉之间不存在交互抗药性关系,但与嘧菌酯之间存在交互抗药性关系;田间抗唑胺菌酯菌株的抗药性能稳定遗传,其适合度指数与敏感菌株相当,表明晚疫病菌对唑胺菌酯具有较高的抗性风险。7.采用脱叶法检测药剂混配的联合毒力,以Horsfall法与Wadley法评价药剂混用是否具有增效作用,结果表明,化合物A与吡唑醚菌酯、百菌清分别以5:5和4:6混配,对抗甲霜灵菌株有明显的增效作用,增效系数分别2.8和2.0;化合物B与百菌清、代森锰锌分别以9:1和3:7混配,对抗甲霜灵菌株亦有增效作用,增效系数分别为1.6和2.2。8.田间交替喷施72%霜脲?锰锌WP(1 080 g a.i./hm2)、68%精甲霜?锰锌WG(1 224 g a.i./hm2)、68.75%氟菌?霜霉威(SC 1 031 g a.i./hm2)和50%烯酰吗啉WP(375 g a.i./hm2)对马铃薯晚疫病具有良好的防控作用(防效90%以上)。检测交替用药地区晚疫病菌对甲霜灵及嘧菌酯的敏感性,发现交替用药可延缓晚疫病菌群体对甲霜灵和嘧菌酯的抗性发展。9.根据田间抗药性检测、替代甲霜灵的高效低抗药性风险药剂筛选、对甲霜灵抗性菌株增效药剂组合筛选、交替用药对甲霜灵抗性发展影响的研究结果,制定了马铃薯晚疫病菌对甲霜灵抗性治理的用药策略,即选用双炔酰菌胺、烯酰吗啉、唑胺菌酯、嘧菌酯等与甲霜灵之间无交抗关系的药剂以及氟菌?霜霉威交替使用,或将化合物A与吡唑醚菌酯、百菌清混用,化合物B与百菌清、代森锰锌混用;限制每个生长季节甲霜灵?锰锌或精甲霜灵?锰锌使用次数不超过2次。
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