绒山羊次级毛囊因其结构变化被分为生长期、退行期和休止期三个阶段。毛乳头细胞（Dermal papilla cells,DPCs）是位于间充质的一类特殊细胞,被认为是旁分泌信号触发毛囊周期循环的中心,可以充当多能干细胞、营养物质和生长因子的储存库,参与调节毛囊的发育和生长,在角质形成细胞形成毛囊和毛干的过程中发挥至关重要的作用。虽然毛囊周期处于动态变化中,但DPCs与上皮细胞之间的相互作用持续存在。探究DPCs的激活和增殖机制可以为阐述绒山羊毛囊生长的作用机制提供理论依据。已有研究表明FGF5和FGF21在绒山羊毛囊生长期和休止期差异表达,但其在皮肤组织的定位及其作用方式仍然不清楚。因此,本研究基于单细胞转录组测序数据分析和组织免疫荧光技术对FGF5和FGF21的表达位置进行定位,并探索其对DPCs的功能和调控机制。本研究获得的主要结果如下:1.FGF5、FGF21及其共同受体FGFR1、FGFR3在陕北白绒山羊生长期皮肤组织中的表达量显著高于休止期;通过分析单细胞转录组测序数据和组织免疫荧光结果表明FGF5、FGF21及其共同受体FGFR1主要在DPCs中表达。2.采用Ad-Easy腺病毒包装系统,成功构建含有FGF5和FGF21编码序列腺病毒载体,并成功包装获得FGF5和FGF21的过表达腺病毒体系pAd-FGF5和pAd-FGF21。随后在DPCs中测定其滴度,其过表达效率达到750000倍以上,通过ELISA检测不同时间DPCs及其细胞培养液中FGF5和FGF21的表达量,确定pAd-FGF5和pAd-FGF21的最佳处理时间为84 h。3.FGF5和FGF21过表达后,MTT结果显示DPCs活力显著下降,Ed U试验结果显示阳性细胞比率也显著下降。流式细胞周期检测发现FGF5能显著降低DPCs在S期和G2期的细胞比率,而FGF21仅能显著降低DPCs在S期的细胞比率。通过RT-qPCR、细胞免疫荧光和Western blotting等技术检测增殖相关基因PCNA、MKI67及FGF5和FGF21的受体表达情况,发现FGF5和FGF21过表达能显著抑制增殖相关蛋白PCNA和MKI67的表达情况,而促进其受体FGFR1和FGFR3的表达。4.利用RT-qPCR、细胞免疫荧光和Western blotting等技术检测Wnt信号通路相关基因表达情况,结果表明FGF5和FGF21能显著抑制CTNNB1的表达,调控下游转录因子TCF3和C-JUN的表达,抑制增殖相关基因C-MYC和CCND1的表达,进而抑制DPCs的增殖。FGF5和FGF21也能够抑制细胞周期相关蛋白ERK及其下游TBX3基因的表达,促进氧化应激反应因子SOD2、GSR、CAT的表达。综上所述,本研究通过对单细胞转录组测序数据分析和组织免疫荧光技术对FGF5和FGF21在绒山羊皮肤中的表达位置进行定位,并在DPCs中过表达FGF5和FGF21,发现其通过调控Wnt信号抑制DPCs的表达,为阐明绒山羊毛囊周期转换的分子机制提供了理论基础。