我们假设PrP可以减轻心肌IRI，具有心肌保护作用。因此，本研究将以PrP为立足点，采用PrP转基因小鼠，在确认PrP对心肌发育无影响的基础上，建立离体及在体心脏IR模型，从心电图ST段改变、左心功能、心肌梗死面积、心肌酶谱等角度观察PrP对心肌细胞的保护效应；在转基因动物水平，比较不同PrP表达水平对心肌Akt、GSK-3β活性的影响，以探讨PrP与PI3K/Akt信号通路的相互作用机制，努力阐明PrP信号通路心肌保护效应的分子机制，为IHD的临床治疗提供理论依据。　　第2章 PrP在小鼠心肌中表达及对心肌形态的影响　　目的：比较PrP在野生型小鼠(WV)、PrP敲除小鼠(KO)、PrP敲入小鼠(Tg180)中的表达，观察PrP对小鼠心肌形态的影响。　　方法：提取小鼠基因组DNA，PCR法检测PrP表达；心肌组组织冰冻切片，免疫荧光检测PrP标志性蛋白3F4；抽提心肌组织总蛋白，Western blot检测3F4表达；心肌组织冰冻切片，HE和Masson’ Tricronme染色观察PrP对心肌形态的影响。　　结果：PCR发现Tg180组和WV组均可见PrP条带，其中Tg180组表达强于WV组，而KO组无条带出现；免疫荧光发现3F4在Tg180小鼠心肌中绿色信号最强，WV组次强，KO组信号最弱；Western blot提示3F4在Tg180组中表达较WV组明显升高，而在KO组中无表达；HE和Masson’ Tricronme染色发现与野生型小鼠相比，PrP敲除与敲入心肌组织形态无明显差异。　　结论：PrP在WV组表达正常，在KO组无表达，在Tg180组表达升高，PrP对心肌形态无影响。　　第3章 PrP对离体心肌的保护作用及相关机制　　目的：明确PrP可减轻心肌缺血再灌注损伤(IRI)，探讨PrP心肌保护作用的相关机制。　　方法：建立Langendorff小鼠离体心脏I/R灌注模型，Power Lab系统同步检测LVDP、dp/dtmax变化，TTC染色检测心肌梗死面积；Western blot检测p-GSK-3β/GSK-3β、p-Akt/Akt蛋白表达。　　结果：Langendorff小鼠离体心脏I/R灌注模型构建成功，与WV组相比，KO组LVDP明显降低，在Tg180组LVDP明显升高；I/R后各组离体心脏的dp/dtmax均出现不同程度降低，相比KO，Tg180的dp/dtmax下降程度明显降低；TTC染色发现与Tg180相比，KO心肌梗死面积也明显增加；Western blot检测发现p-Akt、p-GSK-3β在WV组表达增加，在KO组表达减弱，在Tg180组表达明显增加，并高于WV组。　　结论：PrP可能通过激活PI3K/Akt信号通路，提高缺血后心脏LVDP、dp/dtmax，改善心脏收缩功能，缩小心肌梗死面积　　第4章 PrP改善心肌缺血后的左心功能　　目的：探讨PrP对心肌缺血后左心功能的改善作用。　　方法：冠状动脉左前降支结扎法建立小鼠在体心脏I/R模型，Power Lab系统同步观察心电图ST段、HR、LVDP、dp/dtmax、dp/dtmin变化。于缺血前、再灌注前、再灌注后检测肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)，利用TTC染色测定心肌梗死面积(IS)；Western blot检测p-GSK-3β/GSK-3β、p-Akt/Akt蛋白表达。　　结果：小鼠在体心脏I/R模型成功，心肌I/R后，PrP可增快心脏缺血后HR，提高缺血后心脏LVDP，升高缺血后心脏dp/dtmax与dp/dtmin；降低CK、LDH的释放，缩小IS；Western blot检测发现p-Akt、p-GSK-3β在WV组表达增加，在KO组表达减弱，在Tg180组表达明显增加，并高于WV组。　　结论：PrP通过激活激活PI3K/Akt信号通路，改善心肌缺血后的左心功能。